[发明专利]一种富含SOD北虫草的培育方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种富含SOD北虫草的培育方法。

背景技术

超氧化物歧化酶(SOD)是一种存在于生物体内专一清除超氧阴离子自由基的金属酶，SOD在防御氧中毒，抗辐射损伤及预防衰老等方面起着十分重要的作用。人体内的自由基能杀死侵入体内的病菌、微生物，有保护身体的作用。但这种自由基过多时，它就象攻击细菌一样攻击体内的正常细胞，使细胞受到损伤而被破坏，损伤细胞中的遗传因子DNA，从而引起过早衰老和一系列疾病。体内的SOD可以清除过多的自由基，但人到中年后体内产生的SOD逐渐减少，SOD活力下降，机体衰老。外源补充SOD对于预防疾病、延缓衰老具有显著的功效。

冬虫草是我国特有的中药瑰宝，为麦角菌科，虫草属。较有名的有两个种，一种是生长在青藏高原山地上的冬虫夏草，另一种是生长在东北地区的北虫草。两个种的化学成分及氨基酸、微量元素基本相同，都含有虫草特有的腺苷、虫草酸、虫草素、虫草多糖及超氧化物歧化酶(SOD)等多种不同类型的活性物，使虫草具有广泛而明显的食疗补益功效和多种药理作用。临床医学研究证明，冬虫草对支气管平滑肌有明显的扩张作用，能增进肾上腺素的作用，用于治疗慢性支气管炎阻塞性肺气肿，肺结核等，冬虫草能提高机体免疫功能，延缓衰老，抑制肿瘤细胞，并能改善化疗引起的不良反应。用于治疗神经衰弱等多种疑难疾病的综合治疗，用于手术后恢复体能更可表现出卓越的功效。

北虫草在野外生长过程吸收培养基中的铜、锌元素转化合成超氧化物歧化酶Cu，Zn-SOD。而人工培育北虫草的培养基中Cu，Zn元素含量甚微，现有培育北虫草的技术都没有在培养基中添加转化合成SOD必需的铜、锌盐类，培育出的北虫草子实体中的SOD比活不超过20^u/mg。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种富含SOD北虫草的培育方法，该方法是采用在培养基中添加甘氨酸铜和甘氨酸锌，提供转化合成Cu，Zn-SOD必要的物质基础来实现，使培育出的北虫草子实体SOD比活达到50^u/mg以上。

本发明包括如下步骤：

(1)甘氨酸铜锌溶液的制备

称取甘氨酸铜1克、甘氨酸锌1克溶解在1000毫升水中，备用；

(2)营养液的制备

称取葡萄糖10-30克，蛋白胨10-20克，磷酸二氢钾1-3克，甘氨酸铜、锌溶液2-10毫升，加入到适量热水中，搅拌溶解后补加热水至1000亳升；

(3)培养基的制备

用600毫升规格大口玻璃瓶作培育瓶，加入大米50克，营养液80亳升，用聚丙烯塑料膜封瓶口，移入高压灭菌锅，在126℃温度下灭菌30-60分钟，待气压降至常压时开锅，取出培养基自然冷却至室温；

(4)接种

将培养基移至超净操作台上，打开封瓶口塑料膜，迅速用接种喷枪喷入北虫草液体菌种3-5毫升，封好瓶口；

(5)培育

接种后的培养基移入发菌室，在黑暗中保持温度18-22℃，湿度50-65％发菌5-7天；经5-7天发菌后培养基表面长成一层白色菌丝，移到有散射光照的培育架上，在散射光照下3-5天，白色菌丝渐渐转成桔黄至桔红色。控制温度20-22℃湿度70-85％，7-10天后呈现米粒状的子实体原基，北虫草的培育即进入“出草”阶段；再经过30-40天培育，北虫草子实体长到6-12厘米高，出现桔红色孢子粉时子实体已成熟即可采收；采收后及时干燥，用塑料袋密封，放入20℃以下的干燥室内保存。

本发明在培养基的营养液中加入北虫草生长过程中转化SOD必需的铜、锌元素，为生物转化合成SOD提拱了物质基础，使培育出的北虫草子实体SOD比活可媲美野生北虫草，达到50^u/mg以上。

具体实施方式

实施例1

(1)氨酸铜、锌液的制备：

称取甘氨酸铜1克，甘氨酸锌1克，溶解在1000毫升水中，备用；

(2)营养液的制备：

称取葡萄糖10克，蛋白胨10克，磷酸二氢钾1克，甘氨酸铜锌液4亳升，加入到适量热水中，搅拌溶解后加热水补足1000毫升；

(3)营养基的制备

取大米50克，营养液80毫升放入600毫升规格大口玻璃瓶中，用聚丙烯塑料膜封好瓶口放入高压灭菌锅内，在126℃温度下灭菌40分钟，待气压降至常压时开锅取出，自然冷却至室温；

(4)接种

将培育瓶移至超净台上，打开封瓶塑料膜，迅速用接种枪喷入北虫草液体菌种4毫升，立即封好瓶口。

(5)培育