[发明专利]一种双指标检测用胶体金试纸条及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于临床医学检验领域，具体涉及一种双指标检测用胶体金试纸条及其制备方法。

背景技术

为满足生物医药检测领域的快速检测要求，采用胶体金制备的检测试纸条及试剂盒已经广泛应用。但是，由于一个试剂条只能检测一个指标，而实践中，往往需要同时检测多个指标，采用多个单项检测的试剂盒和试剂条分别操作就显的繁琐费时。

为了解决上述问题，中国专利(专利号：01242327.0)公开了一种多联的试剂盒，可放置多条试剂条，用于同时检测几个指标。但是，该试剂盒结构较复杂，往加样孔加样时也容易污染环境及双手。而且目前还没有一种能够同时检测N-端脑利钠肽前体和心肌肌钙蛋白I的方法或者手段。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的上述不足，提供一种双指标检测用胶体金试纸条，可以解决现有技术存在的不能在一个试纸条中同时检测两个指标的问题。

本发明的另一目的是提供该试纸条的制备方法。

本发明的目的可通过采用以下技术方案予以实现：

一种双指标检测用胶体金试纸条，包括试纸条底衬，以及试纸条底衬上顺次相互搭接粘贴的样品垫、涂覆有金标抗体的聚酯膜、包被膜及吸水纸，包被膜上设有包被兔抗鼠IgG抗体的控制线，包被膜还设有与所述的控制线平行的两条检测线，分别包被能与待检抗原之一特异结合的抗体；所述金标抗体有两种，分别为胶体金标记的能与待检抗原之一特异结合的抗体。

所述的与待检抗原之一特异结合的抗体为能够与待检抗原之一特异结合的单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段或嵌合抗体。

所述的两条检测线中一条包被N-端脑利钠肽前体多克隆抗体，另一条包被心肌肌钙蛋白I单克隆抗体。

所述的金标抗体为胶体金标记的N-端脑利钠肽前体单克隆抗体和胶体金标记的心肌肌钙蛋白I单克隆抗体。

一种双指标检测用胶体金试纸条的制备方法，包括如下步骤：

1)制备包被膜：用包被缓冲液分别稀释能与待检抗原之一特异结合的抗体以及兔抗鼠IgG抗体，并将稀释后的三种抗体分别平行地喷于硝酸纤维素膜的中部上，三种抗体渗入硝酸纤维素膜后分别形成两条检测线和兔抗鼠IgG抗体包被的控制线；

2)制备涂覆金标抗体的聚酯膜：分别制备两种胶体金标记的能与待检抗原之一特异结合的抗体，利用这两种抗体混合物涂覆聚酯膜；

3)组装试纸条：在试纸条底衬上顺次相互搭接粘贴样品垫、涂覆有金标抗体的聚酯膜、包被膜及吸水纸。

步骤1)所述的制备包被膜：用包被缓冲液稀释N-端脑利钠肽前体多克隆抗体、心肌肌钙蛋白I单克隆抗体以及兔抗鼠IgG抗体，并将稀释后的三种抗体分别平行地喷于硝酸纤维素膜的中部上，三种抗体渗入硝酸纤维素膜后分别形成包被N-端脑利钠肽前体多克隆抗体的检测线、包被心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的检测线和兔抗鼠IgG抗体的控制线。

步骤2)所述的制备涂覆金标抗体的聚酯膜的方法是：将胶体金调节为碱性条件下，加入链亲和素溶液，封闭反应后，加入接有生物素的抗体反应，离心去上清，沉淀以金标抗体保存液恢复体积。所述的接有生物素的抗体优选接有生物素的N-端脑利钠肽前体单克隆抗体或接有生物素的心肌肌钙蛋白I的单克隆抗体。

本发明所述的双指标检测胶体金试纸条在同时检测两种待测抗原中的应用。

本发明所述的双指标检测胶体金试纸条在同时检测N-端脑利钠肽前体和心肌肌钙蛋白I中的应用。

本试纸条可以用来检测心肌肌钙蛋白I和N-端脑利钠肽前体的液体样品，操作时，将全血或血浆，血清按一定的量滴加在本试纸条的样品垫上，当出现的结果是在试纸条的N-端脑利钠肽前体检测线、心肌肌钙蛋白I检测线和控制线位置上各出现一条紫红色条带时，表现为两者都是阳性。心肌肌钙蛋白I检测线和控制线各出现一条红色条带，说明心肌肌钙蛋白I为阳性；N-端脑利钠肽前体检测线和控制线各出现一条红色条带，说明N-端脑利钠肽前体为阳性；仅试纸条的控制线8位置上出现一条紫红色条带时，为阴性结果；在试纸条的控制性8位置上未出现紫红色条带时为无效结果。

有益效果：

本发明采用了现代POCT检测中最流行的胶体金技术，通过试纸条上同时设置包被有N-端脑利钠肽前体多克隆抗体的检测线、包被有心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的检测线和兔抗鼠IgG抗体的控制线，能够同步检测两个指标(待测抗原或蛋白)，并且两种抗原不会相互干扰，结果准确，快速，操作简便，可以广泛的应用于心肌损伤，心肌梗死及心衰的同时检测使用。

附图说明

图1本发明的胶体金试纸条的横断面结构示意图；