[发明专利]一种泥鳅温和气单胞菌疫苗的制备与使用方法

权利要求书

1.一种泥鳅温和气单胞菌疫苗的制备方法，其特征在于：它以泥鳅病原温和气单胞菌LD081008A-1（A.sobria LD081008A-1）为免疫原，以黄芪浸出液为佐剂；其步体步骤如下：

（1）将温和气单胞菌LD081008A-1（A.sobria LD081008A-1）菌株接种在普通营养琼脂肉汤培养基上，28℃培养24h，加入终浓度0.3%的甲醛28℃灭活48h，得灭活菌体；

（2）取黄芪用蒸馏水浸泡30-60min后煎煮，过滤，浓缩至终浓度为原药1g/mL，得黄芪浸出液；

（3）将灭活菌体与得黄芪浸出液混合，制得水剂型黄芪佐剂泥鳅温和气单胞菌疫苗；疫苗中病原温和气单胞菌免疫原为2.7×10⁸cells/mL，黄芪浸出液为1g/mL。

2.一种如权利要求1所述的制备方法所制得的泥鳅温和气单胞菌疫苗的使用方法，其特征在于：它采用浸泡免疫的方法，先将受免鱼在充气条件下用质量浓度为8% 的NaCl溶液浸泡5min，然后按体积比1：5用水稀释泥鳅温和气单胞菌疫苗得泥鳅温和气单胞菌疫苗溶液，再将受免泥鳅放于泥鳅温和气单胞菌疫苗溶液中充气浸泡1h，一周后按前述方法加强免疫1次。

3.一种如权利要求1所述的制备方法所制得的泥鳅温和气单胞菌疫苗的使用方法，其特征在于：它采用注射免疫的方法，取体长为10-15cm的泥鳅按0.1mL/尾的免疫剂量进行初次注射免疫，后每隔一周按前述免疫剂量加强免疫1次，共免疫4次。

4.一种如权利要求1所述的制备方法所制得的泥鳅温和气单胞菌疫苗的使用方法，其特征在于：它采用口服免疫方法，将硬颗粒饲料用泥鳅温和气单胞菌疫苗浸泡后投喂，每天鱼体摄入灭活菌体量为2.7×10⁶cells/g体重，连续投喂一周，隔周后再按前述方法进行加强免疫一周。