[发明专利]一种利用耐盐性混合模式吸附剂纯化人尿胰蛋白酶抑制剂的方法

权利要求书

1. 一种利用耐盐性混合模式吸附剂纯化人尿胰蛋白酶抑制剂的方法，其特征是方法步骤为：

a.将人尿胰蛋白酶抑制剂粗品溶解在水中，使得过滤后电导不低于30ms/cm，用稀盐酸将滤液pH调至2-5，接着用耐盐性混合模式吸附剂装柱对人尿胰蛋白酶抑制剂进行静态吸附，再通过常规柱层析纯化方法洗脱并收集人尿胰蛋白酶抑制剂的洗脱高峰；

b.利用pH为7-10的洗脱缓冲液对耐盐性混合模式吸附剂进行洗脱，收集人尿胰蛋白酶抑制剂的洗脱高峰；

c.将收集的人尿胰蛋白酶抑制剂洗脱高峰进行冷冻干燥，即得到高纯度的人尿胰蛋白酶抑制剂。

2.根据权利要求1所述的利用耐盐性混合模式吸附剂纯化人尿胰蛋白酶抑制剂的方法，其特征是所述耐盐性混合模式吸附剂的结构为为：                                               。

3.根据权利要求1所述的利用耐盐性混合模式吸附剂纯化人尿胰蛋白酶抑制剂的方法，其特征是耐盐性混合模式吸附剂的载体包括甲基丙烯酸聚合物、琼脂糖或纤维素。

4.根据权利要求2所述的利用耐盐性混合模式吸附剂纯化人尿胰蛋白酶抑制剂的方法，其特征是所述耐盐性混合模式吸附剂的制备方法为：

a.活化：取甲基丙烯酸聚合物、琼脂糖或纤维素作载体，将载体与溶解于丙酮中的羰基二咪唑在30℃条件下搅拌反应，洗涤后抽干，得到活化的载体介质；

b.接臂：将活化的载体介质加入到氨基己酸溶液中30℃搅拌，进行缩合反应，得到氨基己酸-甲基丙烯酸聚合物复合物；

c.偶联：氨基己酸-载体介质复合物再与苯乙胺发生偶联反应，控制氨基己酸与苯乙胺的缩合反应，使得反应后羧基含量不低于30%，得到耐盐性混合模式吸附剂；

d. 上述氨基己酸溶液：1kg氨基己酸溶于1升 pH9.3 碳酸盐缓冲液；以上各步反应所用的试剂用量比例见下表：

载体基质羰基二咪唑氨基己酸苯乙胺1升300-400克800-1200克12-18克

5.根据权利要求1所述的利用耐盐性混合模式吸附剂纯化人尿胰蛋白酶抑制剂的方法，其特征是洗脱缓冲液为磷酸二氢钠溶液、磷酸氢二钠溶液、氢氧化钠溶液、碳酸钠溶液、碳酸氢钠溶液、氨水、铵盐溶液、氯化钠溶液的一种或若干种的混合物。