[发明专利]一种用于金龟子绿僵菌生产的培养基

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于金龟子绿僵菌培养中使用的培养基新配方，该金龟子绿僵菌主要用在甾体生物发酵过程中将沃氏氧化物转化为霉菌氧化物，属于工业真菌发酵技术领域。

背景技术

甾体是一类含有环戊烷多氢菲核的化合物，在医药上具有广泛的用途。在甾体化合物生产过程中，羟化反应是甾体微生物转化中最重要的反应。由于微生物能在甾体的任何位置进行羟基化反应，而化学方法除了较易在C17引入羟基外，在其他位置都很难引入，所以采用真菌，比如用绿僵菌来催化甾体化合物的转化是一种比较先进可行的生产工艺。在发酵工业生产中，筛选合适的、而且成本相对较低的培养基用来培养绿僵菌就显得至关重要。

然而经查新检索，关于金龟子绿僵菌培养基方面的技术文献很少，特别是将金龟子绿僵菌作为甾体发酵生产的工业真菌培养的培养基配方尚未见报道。文献中所报道的金龟子绿僵菌的培养基配方大多为固体培养基，比如PDA培养基；其液体发酵的培养基采用以各种化学原料提供微量元素，以葡萄糖、蔗糖、马铃薯淀粉、乳糖、麦芽糖、D-果糖、D-山梨糖、甘露醇等为碳源和以花生饼粉、豆饼粉、麦麸、鱼粉、KNO等为氮源，这些培养基对金龟子绿僵菌的培养研究主要是将金龟子绿僵菌作为农林害虫生物防治的病原真菌进行培养，不适合用于作为甾体生物发酵过程中将沃氏氧化物转化为霉菌氧化物。

发明内容

本发明的目的是提供一种提供一种用于发酵生产金龟子绿僵菌的培养基配方，可对金龟子绿僵菌进行一级种子液、二级种子液生产和大规模发酵罐生产，其金龟子绿僵菌适合以沃氏氧化物为底物转化为霉菌氧化物，金龟子绿僵菌在此培养基配制的营养液中生长迅速，菌体不容易结球，而且生产成本相对低廉。

实现本发明目的所采取的技术方案如下：该发酵生产金龟子绿僵菌的培养基配方由葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、菜籽油饼粉、青刺果粉、棉籽粉和普通自来水等为原料配制而成，每1000ml培养基中含有，葡萄糖2.0～4.5wt%，蛋白胨0.4～0.7wt%，硫酸镁0.03～0.07wt%，菜籽油饼0.2～0.6wt%，青刺果粉0.1～0.3wt%，棉籽粉0.1～0.3wt%，余量为水。

青刺果粉的原料为新鲜的榨油剩下的青刺果废料的粉料，且青刺果废料、菜籽油饼和棉籽的破碎粒度为1～2mm，三者应加水在50～55℃下加热溶解并灭菌后再与其他原料混合。

本发明的有益效果是：与现有技术比较，其明显的特点是由本培养基所培养的绿僵菌生长迅速而均匀，菌体一般不容易结球；此外，本发明所采用的培养基原料很多为工业生产废料，其来源广，产量大，且常年可供应，生产成本低廉，同时也体现了低碳和循环生产的特点。

具体实施方式

以下三个表中例举了本发明培养基的几组实施例。

表1 采用新配方培养基生产金龟子绿僵菌实例对照表*

表2  6t种子罐发酵金龟子绿僵菌实例对照表*

表3 　30t发酵罐发酵金龟子绿僵菌实例对照表*