[发明专利]花器官发育基因NsAGL6及其植物表达载体和构建方法

权利要求书

1.睡莲花器官发育基因NsAGL6，该基因的序列为SEQ ID NO.1。

2.睡莲花器官发育基因NsAGL6的植物表达载体，其特征在于由权利要求1所述的睡莲花器官发育基因NsAGL6与质粒pCAMBIA 1301-220构成。

3.根据权利要求2所述的睡莲花器官发育基因NsAGL6的植物表达载体，其特征在于所述的植物表达载体为NsAGL6基因连接到线性化的pCAMBIA 1301-220质粒而得到的。

4.权利要求3所述的睡莲花器官发育基因NsAGL6植物表达载体的构建方法，其特征在于包括如下步骤：

1)睡莲花器官发育基因NsAGL6的克隆

以睡莲小花蕾为材料，提取总RNA，反转录为cDNA，设计引物并用高保真酶扩增NsAGL6基因，

上游引物NsAGL6-F：SEQ ID NO.2

下游引物NsAGL6-R：SEQ ID NO.3

以反转录的cDNA为模板，进行聚合酶链式PCR反应，产物连接到pMD19-T Simple载体，转化TOP10感受态细胞，进行序列测定；

2)植物表达载体pCAMBIA 1301-220-NsAGL6的构建

从TOP10菌株中提取提取pMD19-T Simple-NsAGL6重组质粒，Sma I和BamH I双酶切后回收NsAGL6片段，再插入到线性化的pCAMBIA 1301-220质粒，转化TOP10感受态细胞，提取阳性质粒，酶切电泳检测并测序验证，植物表达载体pCAMBIA 1301-220-NsAGL6构建成功。