[发明专利]粘质沙雷氏菌

说明书

技术领域：

本发明涉及微生物领域中一株粘质沙雷氏菌。

背景技术：

神灵杆菌脂多糖，原名灵杆菌素(Prodigiosin prodigiozan”[又名灵杆菌多糖、灵杆菌LPS(lipopolysaccharide)曾用名：灵杆菌素(prodigiosin，Hemarisin)]是从革兰氏阴性杆菌粘质沙雷氏菌又名神灵杆菌细胞壁中提取的一种脂多糖。

神灵杆菌脂多糖研究之初中国的医药处于起步阶段，许多药品的质量标准还不完善，质量控制不严格。导致许多功效显著、疗效确切的药品不良反应显著，而神灵杆菌脂多糖是其中最典型的代表，由于生产手段和鉴别方法的基础研究进行的较少，还需要进行大量实验加以补充才能对该制剂的功能做出全面正确的评价。国产神灵杆菌脂多糖生产过程中设备简陋、生产技术陈旧，从原料到提取过程没有进行严格的质量控制，同时没有注意到各学科之间的交叉互补，药学和免疫学等相关学科的前沿的分析手段和理念没有更好的为灵杆菌素的提取及药理研究服务。同时，对其质量的稳定性控制没有严格的规定，严重打破了临床应用过程中药品使用的安全、有效和可靠性的标准，导致虽然功效独特，但副反应严重，例如热原和过敏现象。

发明内容：

本发明的目的是提供一株高产神灵杆菌脂多糖粘质沙雷氏菌，可以提高神灵杆菌脂多糖质量稳定性的同时，完善了国家对神灵杆菌脂多糖注射剂的质量标准，为以后工业化提供理论基础和特异性的手段和方法。开创了微生物制药的新思想。

上述目的通过以下技术方案实现：

粘质沙雷氏菌ZJH20098(Serratia marcescens ZJH20098)，已于2010年7月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址是：中国北京市朝阳区北辰西路1号院(100101)，保藏号为：CGMCC No.4010。

所述的粘质沙雷氏菌ZJH20098(Serratia marcescens)，由采集于临床感染病人体内，经分离、纯化、物理诱变、优选获得的高活性菌株，28℃固体培养基培养24h后菌落呈玫瑰红色，色素不断扩散到培养基中，菌落开始时出现半透明粘稠液滴，菌落呈圆形，光滑，湿润，表面隆起呈玫瑰金属光泽，边缘整齐，有恶臭气味，在37℃培养菌落呈乳白色。

所述的粘质沙雷氏菌ZJH20098(Serratia marcescens ZJH20098)，能利用柠檬酸盐和醋酸盐作为碳源，不发酵阿拉伯糖，葡萄糖发酵实验产生少量气体；还可发酵纤维二糖、肌醇和甘油，不产气；M.R.测定为阴性，V.P.测定为阳性；经16S rDNA部分序列在线进行BLAST比对，结果具有Serratia菌属marcescens菌种的主要遗传特性。

有益效果：

1.灵杆菌素有明显抑瘤和升高白血球作用，能提高机体的非特异性免疫功能。具有对肌肉无刺激性，对机体毒副作用小。临床上应用特别是对某些久治不愈的急慢性盆腔炎和因放疗、化疗引起的白细胞减少症都取得良好疗效。由于当时的生产工艺灵杆菌素原料易得，用量少，疗效肯定，达到了国外同类药品的先进水平，为我国医药工业填补了一项空白，得到了药品生产主管部门的认可。

本发明项目研究采用目前现代化的微生物鉴定手段详细地对经临床感染患者体内分离、诱导、优选出的粘质沙雷氏菌ZJH20098(Serratia marcescensZJH20098)进行了检测，从微生物生理形态、遗传、生化对其进行的鉴定，为确保粘质沙雷氏菌ZJH20098(Serratia marcescens ZJH20098)稳定奠定了理论基础。这在生物药品、生物制品研究和生产质量控制及管理具有开创性的意义。

2.本发明项目研究过程中采用仪器分析、药物分析、微生物生理和生化等相关的先进的分析和检测手段(如：TLC、HPLC、示差折光检测仪等)对神灵杆菌脂多糖的活性成分进行明晰化，并对神灵杆菌脂多糖制备生产的整个过程，从菌种保存管理、发酵、提取、纯化整个过程进行质量跟踪监控，从而为药品质量监管提供一些理论基础和创新性的手段、方法。同时，应用免疫学和病理、毒理学的方法来对神灵杆菌脂多糖的抗病毒、抗感染、抗肿瘤等方面的免疫作用进行验证。力图提高灵杆菌脂多糖质量稳定性的同时，完善包括对神灵杆菌脂多糖注射剂的国家质量标准，为以后微生物制药工业化生产和质量控制提供理论基础和特异性的手段。开创了生物制药制药的新思想和管理模式。