[发明专利]高速逆流色谱纯化茶皂素的方法

权利要求书

1.高速逆流色谱纯化茶皂素的方法，其特征在于包括以下工艺步骤：

1）茶皂素粗品的制备：取经脱脂后的油茶饼粕加入极性溶剂进行回流浸提，浸提液经抽滤得清液，清液除去极性溶剂后，进行冷冻干燥，即得到茶皂素粗品；

2）溶剂的配置：将乙酸乙酯、正丁醇、水按体积比0.8～1.2: 0.8～1.2:1.8～2.2混合，剧烈振摇5～15min，超声波脱气15～20min，静置过夜，使溶液分为上下两相，分层后下相作为固定相，上相作为流动相；

3）样品制备：取步骤1）得到的茶皂素粗品溶解于20～30倍体积的流动相中，得到样品溶液；

4）分离纯化：将固定相以最大流速装满色谱分离柱，然后开启速度控制器，使高速逆流色谱仪按顺时针方向旋转，当主机速度达到500～600rpm时，以6～10ml/min的流速泵入流动相，待流动相流出两相溶剂体系在色谱分离柱中达到平衡时，取样品溶液通过进样六通阀进样，然后根据紫外色谱图，分别收集与第一个峰保留时间对应的流出液，流出液进行浓缩、冷冻干燥后，即得到高纯度的茶皂素。

2.如权利要求1所述的高速逆流色谱纯化茶皂素的方法，其特征在于所述的步骤1）中油茶饼粕采用石油醚或正己烷抽提除去残留油脂。

3.如权利要求1所述的高速逆流色谱纯化茶皂素的方法，其特征在于所述的步骤1）中脱脂后的油茶饼粕加入8～12倍体积的60%乙醇进行回流浸提1～3小时得清液。

4.如权利要求1所述的高速逆流色谱纯化茶皂素的方法，其特征在于所述的步骤2）乙酸乙酯、正丁醇、水按体积比1:1:2混合。

5.如权利要求1所述的高速逆流色谱纯化茶皂素的方法，其特征在于所述的步骤2）中溶剂体系剧烈振摇7～13min,超声波脱气16～18min。

6.如权利要求1所述的高速逆流色谱纯化茶皂素的方法，其特征在于所述的步骤3）中当主机速度达到520～580rpm时，以7～9ml/min的流速泵入流动相。

7.如权利要求1所述的高速逆流色谱纯化茶皂素的方法，其特征在于所述的步骤3）中紫外检测波长为215nm。

8.如权利要求1所述的高速逆流色谱纯化茶皂素的方法，其特征在于所述的步骤3）中流出液在旋转蒸发器上45～55℃减压浓缩除去乙醇，冷却至温度15～25℃ ，再在冷阱温度-65--55℃，真空度1Pa下进行冷冻干燥。