[发明专利]羊外周血淋巴细胞的分离方法

权利要求书

1.一种羊淋巴细胞分离的方法，其特征在于包括如下步骤：

a.准备有抗凝剂的注射器，从羊颈静脉中采取外周血；

b.用等体积的Hank’s液稀释外周血，后混匀；

c.将人淋巴细胞分离液以0.6-1.0mL/管的量分别置于容器中；

d.吸取稀释血液1-3mL，沿管壁缓缓的叠加到界面上，将容器放入离心机；

e.使容器在离心力作用下，其内部的溶液形成不同层次的区带，使得容器中由下至上分别为红细胞层、分离液层、淋巴细胞层、血浆层；

f.吸取淋巴细胞层。

2.根据权利要求1所述的淋巴细胞分离的方法，其特征在于：所述采血为静脉采血。

3.根据权利要求1所述的淋巴细胞分离的方法，其特征在于：所述吸取淋巴细胞层的方式为使用移液器吸取。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的淋巴细胞分离的方法，其特征在于：所述的步骤d中离心机转速为2000-3000rpm。

5.根据权利要求1-3任意一项所述的淋巴细胞分离的方法，其特征在于：所述的步骤d中离心时间为25-30min.

6.根据权利要求1-3任意一项所述的淋巴细胞分离的方法，其特征在于：还包括用Hank’s液洗淋巴细胞层2-3次。

7.根据权利要求1-6任意一项所述羊淋巴细胞分离方法，其中所述的羊为绵羊，进一步优选为卡拉库尔羊。