[发明专利]一种用于检测甲型流感病毒的偶联物、其制备方法和用途

权利要求书

1.一种用于检测甲型流感病毒的偶联物，其特征在于，所述偶联物包括：

1)聚联乙炔囊泡；和

2)偶联到所述聚联乙炔囊泡上的特异性识别甲型流感病毒的单克隆抗体；

优选地，所述单克隆抗体是用完整或部分甲型流感病毒NP蛋白、完整或部分甲型流感病毒NP蛋白的编码基因构建的真核表达载体免疫小鼠制备的单克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的偶联物，其特征在于，所述偶联物中聚联乙炔囊泡与所偶联的单克隆抗体之间的比为1μmol∶1μg。

3.根据权利要求1或2所述的偶联物，其特征在于，所述聚联乙炔囊泡是由二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱与10，12-二十五二炔酸混合制备的。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的偶联物，其特征在于，所述聚联乙炔囊泡的制备方法包括：

将二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱与10，12-二十五二炔酸分别以1mM的浓度，按4∶6的摩尔比混合，再经过超声水合处理和紫外光照射聚合处理。

5.根据权利要求4所述的偶联物，其特征在于，所述超声水合处理的条件为：超声温度80℃，超声功率200W，每间隔5秒工作5秒，共15分钟，冷却至室温后，经4℃过夜；

所述紫外光照射聚合处理的条件为：照射波长254nm，照射功率32W，照射时间30分钟。

6.制备权利要求1至5中任一项所述偶联物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)制备聚联乙炔囊泡；

2)在偶联剂作用下，将特异性识别甲型流感病毒的单克隆抗体偶联到步骤1)所制备的聚联乙炔囊泡上。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中制备聚联乙炔囊泡的方法如下：

将二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱与10，12-二十五二炔酸以1mM的浓度，按4∶6的摩尔比混合，再经过超声水合处理和紫外光照射聚合处理；

优选地，所述超声水合处理的条件为：超声温度80℃，超声功率200W，每间隔5秒工作5秒，共15分钟，冷却至室温后，经4℃过夜；和/或所述紫外光照射聚合处理的条件为：照射波长254nm，照射功率32W，照射时间30分钟。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中的偶联剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺。

9.根据权利要求6至8中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中的偶联方法如下：在室温，用和步骤1)制备的聚联乙炔囊泡中10，12-二十五碳二炔酸分别为等物质量的所述两种偶联剂活化聚联乙炔囊泡30分钟，再加入特异性识别甲型流感病毒的单克隆抗体于4℃下搅拌3～4小时，在pH 7.4的磷酸缓冲液中透析过夜，即得。

10.权利要求1至5中任一项所述偶联物在制备用于检测甲型流感病毒的工具中的用途。

11.一种用于检测甲型流感病毒的试剂盒，其包含权利要求1至5中任一项所述偶联物。