[发明专利]沙棘总黄酮提取纯化的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及黄酮化学物质提取纯化领域，尤其是涉及一种沙棘 总黄酮提取纯化的方法。

背景技术：

黄酮：其全称应是“生物类黄酮物质”，广泛存在于自然界，其 种类已发现有3000种左右，其分子结构均具有C6·C3·C6的多元酚 化合物，在两个芳香环(A、B环)之间以三碳链相连，以上的共同 结构加上不同的侧链基团组成不同种类的甙种类的甙元，如：槲皮素， 异鼠李素、山奈酚，杨梅酮，芹菜素等等，这些不同的甙元又与不同 的糖类分子连接，如：葡萄糖、鼠李糖、槐二糖、巢菜糖等等，于是 形成了数千种黄酮类化合物。过去把它们统称为维生素P，现在科学 界将这些化合物归入植物多酚类，故黄酮类化合物是植物多酚类中一 个大家属。黄酮类物质对人体健康关系密切，是一类优良的抗氧化物 质，现已发现在沙棘植物中含有32种黄酮类化合物(黄酮苷)，很多 中草药的有效成分也是黄酮物质。

现有技术中对于沙棘黄酮的生产工艺主要为醇提水沉淀法(以 下简称醇提)，其工艺步骤包括：脱脂，乙醇回流提取，过滤，浓缩， 再用乙酸乙脂对浸提浓缩液溶解过滤、纯化，浓缩、干燥成品。而该 方法的缺点在于，由于现今食用乙醇的价格每吨已大于7000元，致 使用醇提方法生产的沙棘黄酮，其成本已超过1200元/KG，成本高居 不下，使沙棘黄酮生产困难极大。

现有技术中也有以沙棘叶作原料，进行了水浸提(以下简称水提) 沙棘叶总黄酮的工艺研究。其工艺包括：将沙棘叶清洗去杂，然后干 燥粉碎，接着用石油醚脱脂，热水浸提，过滤，对滤液调PH，沉淀， 水洗至中性，然后乙醇淋洗，将滤液浓缩，沉淀，过滤，干燥，最后 获得产品。这种方法在现有技术中的一个具体例子如下：

A.沙棘叶的脱脂：取190克去杂干燥粉碎的沙棘叶，用400毫 升石油醚(沸程60-90℃)浸泡1小时后，75℃回流1小时，过滤后 叶渣再用200毫升石油醚回流1小时，再过滤。

B.水浸取：脱脂后叶渣挥发尽石油醚后加1500毫升水浸泡30 分钟，回流30分钟，过滤，滤渣再分别用900毫升，600毫升水各 回流30分钟，滤液合并后，冷却至室温，得水提取液。

C.调PH值分离出粗黄酮苷，用1∶1盐酸调节水提取液的PH值， 因黄酮苷类在酸性条件下溶解度小，可用酸沉淀使其析出，但酸性不 宜过强，以免生成烊盐和发生水解，使析出的黄酮苷类(TFH)又重 新溶解。实验得知，当提取液PH值为3时，TFH得率值最高，黄酮 得率达1.05％。

D.30％乙醇淋洗得产品：粗黄酮苷中含蛋白质，多糖及花色素等 多酚类杂质，用30％乙醇淋洗，这样可以减少溶于高浓度醇的干扰杂 质，而对黄酮苷的溶解影响不大。

然而用“水提”法所得产品含量黄酮仅为8.4％，离合格产品(18％) 太远，且得率也偏低(1.05％)，无生产意义。

发明内容：

本发明的目的在于克服上述技术存在的缺陷，提供一种价廉高效 的沙棘总黄酮提取纯化方法。

由于沙棘叶黄酮中所含的4种黄酮苷元：槲皮素，山奈酚，异鼠 李素和杨梅酮(也称杨梅素)，其分子结构中均含丰富的酚羟基，可 与碱成盐后溶于水，是这些苷元在天然沙棘叶中均成苷类存在，它们 均连有数个不同的糖分子，如此更增加了其水溶性，发明人在大量的 实验以及反复验证后发现，用稀碱水进行提取，可大大提高得率。极 稀的碱液代替乙醇，其成本比水稍高一点点，而乙醇(95％浓度)现 价要7000元/吨以上，若用70％乙醇提取，每吨也要5000元以上， 而水的价每吨是几元，成本之差有1000倍以上，因而大大降低了提 取成本。

一种沙棘总黄酮提取纯化的方法包括以下依次的步骤：提供原 料，脱脂，提取，过滤，滤液调节pH，离心分离，沉淀物进行醇溶 超声波提取，离心分离，回收乙醇，加纯水和澄清剂处理，离心分离， 清液树脂吸附，水洗，乙醇洗脱，洗脱液浓缩，干燥，获得产品，其 中所述提取为稀碱提取，所述稀碱提取步骤为：加入1∶15-30(W/V) 质量百分比浓度为0.3％-0.5％的稀碱溶液进行提取，其中所述稀碱是 基于沙棘干燥叶片的重量计算，提取温度为70-95℃，提取时间15-25 分钟。该提取的工艺条件避免黄酮苷类的水解开环。