[发明专利]香蕉细菌性软腐病害病原菌分子快速检测的方法与应用

权利要求书

1.-种香蕉细菌性软腐病害病原菌分子快速检测的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)设计PCR引物，其中：

上游引物LF：5’-TTCGTCTAGAGGCCCAGGAC-3’

下游引物LR：5’-TCAGCTTGTTCCGGATTGTT-3’；

(2)对样本进行处理，得到样本中的DNA；然后以样本的DNA为模板，进行PCR反应，电泳检测PCR产物，当PCR产物呈现171bp条带，即样本中含有香蕉细菌性软腐病害病原菌。

2.根据权利要求1所述香蕉细菌性软腐病害病原菌分子快速检测的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的样本为香蕉植株组织时，所述处理的方式为利用CTAB法抽提香蕉植株组织中的DNA。

3.根据权利要求1所述香蕉细菌性软腐病害病原菌分子快速检测的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的样本为土壤时，所述处理的方式为用无菌水浸泡土壤，得到的上清液为模板。

4.根据权利要求3所述香蕉细菌性软腐病害病原菌分子快速检测的方法，其特征在于：所述处理的方式为每0.5克土壤使用1ml无菌水浸泡半小时，得到的上清液为模板。

5.根据权利要求1所述香蕉细菌性软腐病害病原菌分子快速检测的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的样本为病水时，所述处理的方式为用0.22μm的滤膜对病水进行过滤富集，制备病菌浓度更高的病水作为模板。

6.根据权利要求1所述香蕉细菌性软腐病害病原菌分子快速检测的方法，其特征在于：步骤(2)中所述PCR反应中的反应条件为94℃预变性5min；94℃变性20s，53℃退火20s，72℃延伸30s，35个循环；72℃总延伸10min。

7.权利要求1～6任一项所述香蕉细菌性软腐病害病原菌分子快速检测的方法应用于香蕉种苗检疫、田间香蕉软腐病的早期诊断以及病菌的监测和鉴定。