[发明专利]一种制备脱氧核糖核苷三磷酸的新方法无效
| 申请号： | 201110003406.1 | 申请日： | 2011-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN102168123A | 公开（公告）日： | 2011-08-31 |
| 发明（设计）人： | 吕朝阳;张煜星 | 申请（专利权）人： | 吕朝阳 |
| 主分类号： | C12P19/32 | 分类号： | C12P19/32;C12P19/30;C07H19/04;C07H1/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 832000 新疆维吾尔*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 脱氧 核糖 核苷 磷酸 新方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备脱氧核糖核苷三磷酸的新方法，本发明是通过以下过程和方法实现的：
(1)化学合成：以dNMP为原料，其水溶液用盐酸调pH值为4-6，加入5-10倍物质量的DCC、4-8倍物质量的正磷酸三丁胺，以2倍体积的乙醇作为溶剂，80℃搅拌反应10小时，冰浴100min后过滤除不溶物，所得液体在40℃条件下旋转蒸发除乙醇，得到的混合物加入50-60倍体积的H2O溶解，用氢氧化钠调pH为中性，所得混合物为dNMP、dNDP和磷酸盐的水溶液，其中含dNDP70％-90％，经阴离子树脂柱层析分离后得到纯净的dNDP。
(2)酶促反应：dNDP水溶液中加入4-6倍物质量的PEP-Na，用氢氧化钠溶液调节pH为6-8，以ATP-Na为催化剂，再加入丙酮酸激酶和金属离子，在50-60℃条件下进行酶促反应48-72小时，即可得到dNDP和dNTP的混合物，dNTP的含量在60％-80％之间，将该混合物层析分离可得到纯度为97％-99％的dNTP。
2.如权利要求1所述的脱氧核糖核苷三磷酸的制备方法，其特征在于：金属离子为：氯化锂、硫酸锂、醋酸锂、七水硫酸镁、氯化钾、硫酸钾。
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