[发明专利]L3和/或L5源作为寄生虫病疫苗或诊断的用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于制备治疗、预防和/或诊断寄生虫病的药剂或药物的L3和/或L5源。

背景技术

利什曼病包括若干种由属于利什曼原虫（Leishmania）属的细胞内原生寄生虫引起的疾病，利什曼原虫主要感染各种哺乳动物（包括人和犬）的巨噬细胞。疾病谱在很大程度上取决于寄生虫的种类和人宿主的免疫能力状态，范围从自愈的皮肤利什曼病（CL）到致死的内脏利什曼病（VL）或黑热病（kalaazar）（18）。由婴儿利什曼原虫（Leishmania infantum）和恰氏利什曼原虫（L.chagasi）引起的犬内脏皮肤利什曼病（VCL）是发现于地中海盆地、中东和拉丁美洲周围国家的重要新兴动物传染病（16）；作为这些寄生虫的主要储主，犬在通过白蛉（phebotomine sand flies）（44）传播给人中起着重要的作用。感染的结果由宿主免疫系统和不同寄生虫种类间的相互作用决定，但是利什曼病的发病机理仍是不清楚的且关于涉及对人和犬中利什曼原虫的免疫反应的机制的认识仍是有限的。一般而言，保护性免疫与典型的细胞介导的免疫反应相关，该典型的细胞介导的免疫反应通过T细胞产生的细胞因子诱导巨噬细胞活化。另一方面，不可治愈的疾病与强烈的体液反应的产生相关（15、24）。

基于未加工的寄生虫成分或确定的寄生虫抗原，对于第二代疫苗的开发的研究，集中于不同表面或分泌的寄生虫分子（secreted parasite molecules）的鉴定，所述分泌的寄生虫分子已利用不同佐药以几种试验模式作为候选疫苗被测试（1、17、20、43、45、46、49、50）。来自感染的动物或人的血清的表达库的筛选能够促进作为候选疫苗的一些抗原的选择（参见（9））。在表达库中，在感染的小鼠或患者细胞中主要引出Th₁-型免疫反应的表达库，不考虑细胞位置，与不同动物模型中的保护性反应的产生有关（48、51、52）。另一方面，一些分离的抗原为细胞内保守蛋白，在用实验方法感染的小鼠中，所述细胞内保守蛋白主要刺激遭受VL或Th₂-介导的体液反应的人或犬中的体液反应（3、33、35、37、39）。在患有利什曼病的犬中对利什曼病所引起的不充足的体液反应被认为会导致免疫病理（immunopathology），主要由于免疫复合物（immune complexes）的副作用如葡萄膜炎（uveitis）（13）、中枢神经系统病变（central nervous system lesions）（14）或肾炎（21、22、30、31）。最近还显示了人体内IgG免疫复合物的存在和VL与不能解除感染相关，表明了免疫复合物对感染的宿主可能是不利的（27）。

尽管不作为优良的疫苗候选被首先考虑，在感染过程中引起强烈体液反应的蛋白质与保护性反应的诱导相关。例如，寄生虫的微管蛋白和组蛋白H2B被来源于免疫供体的T-细胞克隆识别（36）。另外，通过免疫小鼠的T细胞，rK39引起增殖并产生IFN-γ（23）。还显示了在小鼠内脏利什曼病模型中，利用寄生虫H2B、H3和H4基因的基因免疫会引起保护（62）。而且，激活的C激酶（LACK）受体的免疫（29），一些寄生虫半胱氨酸蛋白酶（38、41）或形成Th₁促进佐药管理的组蛋白的寄生虫核小体（11、19）产生了与小鼠模型中抗皮肤利什曼病的保护相关的免疫反应。

在利什曼原虫进化的保守抗原中，几种迹象表明，在利什曼原虫感染过程中，核糖体蛋白质为免疫相关的分子。一些情况下，在感染过程中，核糖体成分能够通过调节细胞活性和细胞因子的释放的能力导致宿主免疫系统功能紊乱。因此，将硕大利什曼原虫（L.major）核糖体蛋白质S3a注入BALB/c小鼠中，引起了B-细胞克隆的多克隆扩增（polyclonal expansion）并抑制了T-细胞的增殖（10）。而且，在小鼠模型中，通过IL-10和Th₂细胞因子的诱导，利用DNA疫苗编码用于公认的60S核糖体蛋白质L31的基因免疫加重了病情（41、63）。另外，在患有利什曼病的犬和人中，一些寄生虫核糖体蛋白质如寄生虫酸性P蛋白与强烈体液反应的发生相关（参见（39））。然而，还指出了几种试验的核糖体蛋白质并不能诱导产生免疫性的保护性反应，或者获得的免疫性保护反应是次优的（55、41）。

目前，虽然做了许多努力，但仍没有针对寄生虫病（如利什曼原虫病）有价值的疫苗。因此，仍然迫切需要这种疫苗。

发明内容