[发明专利]含有嗜热脂肪地芽孢杆菌脂肪酶的洗涤剂组合物及其使用方法

说明书

优先权

本专利申请要求2009年12月21日提交的系列号为61/288,682的美国临时专利申请的优先权，藉此将该专利申请全文以引用的方式并入本文中。

技术领域

本发明的组合物和方法涉及从嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)克隆的脂肪酶、编码所述脂肪酶的多核苷酸以及其使用方法。

背景技术

当前的衣物洗涤剂和/或织物护理组合物包括诸如表面活性剂、酶(蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和/或纤维素酶)、漂白剂、助洗剂系统(builder system)、抑泡剂、悬污剂、去污剂、荧光增白剂、软化剂、分散剂、染料转移抑制化合物、研磨剂、杀细菌剂和芳香剂之类的活性成分的复杂组合。

脂肪分解酶(包括脂肪酶和角质酶)已被用于洗涤剂清洁组合物中，以通过水解甘油三酸酯产生脂肪酸来去除油渍。然而，清洁组合物中存在的表面活性剂和其它组分常常会抑制这些酶，干扰其除去油渍的能力。因此，需要可在清洁组合物的苛刻环境中起作用的脂肪酶和角质酶。

还需要有效进行转酯反应以便制造生物燃料、润滑剂以及其它合成和半合成烃的较为稳健且有效的脂肪酶和角质酶。优选地，这些酶将利用天然存在或常用的原料，而且在合成反应中不需要保护和去保护步骤，这些保护和去保护步骤会使合成变得复杂以及导致产生有毒废产物。

发明内容

本发明组合物和方法涉及从嗜热脂肪地芽孢杆菌T1菌株(GeoT1)克隆的热稳定性脂肪酶。在一些实例例中，GeoT1与细菌纤维素酶的催化结构域的羧基末端融合。在一些实例例中，细菌纤维素酶是源自在位于荷兰巴伦(Baam，The Netherland)的皇家荷兰生物科技研究所培养物保藏中心(Central Bureau voor Schimmelcultures)以CBS 670.93(称为BCE103)保藏的芽孢杆菌属(Bacillus)菌株。在一些实例例中，GeoT1通过可裂解连接物连接至BCE103纤维素酶。因此，在一些实例例中，GeoT1不是融合蛋白。

在本发明的一个方面中，提供了重组嗜热脂肪地芽孢杆菌GeoT1多肽。在一些实例例中，重组GeoT1多肽与SEQ ID NO：4的氨基酸序列具有80％至99％的同一性(例如80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性)。在其它实例例中，重组GeoT1多肽是包含BCE103纤维素酶氨基末端片段的融合蛋白。在一些实例例中，重组GeoT1融合蛋白与SEQ ID NO：5的氨基酸序列具有至少80％的同一性(例如80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性)。除非具体说明，否则本文使用的术语GeoT1多肽涵盖GeoT1融合蛋白以及缺少融合搭配物的成熟GeoT1多肽两者。在一些实例例中，GeoT1多肽是在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中表达。在其它实例例中，Geot1多肽是在变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)中表达。本发明还提供一种表达载体，其包含与启动子有效组合的编码GeoT1多肽的多核苷酸。