[发明专利]细胞的选择性裂解

权利要求书

1.一种选择性裂解包含或疑似包含微生物的样品内的真核细胞的方法，所述方法包括以下步骤：

a)提供包含或疑似包含微生物的带有真核细胞的样品，

b)向所述样品中加入非离子型去污剂和缓冲液以获得具有约9.5或更高的pH的溶液；

c)将所述溶液孵育足够长的时间段以裂解所述真核细胞。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述样品是哺乳动物血液样品。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述血液样品是全血。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述微生物是细菌。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述微生物是真菌。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述孵育步骤c)进行30秒和10分钟之间。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中加入的去污剂和加入的缓冲液的体积与样品的体积之间的比例在2/1和1/10之间。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述非离子型去污剂以0.1％和5％(w/v％或v/v％)的浓度存在。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述非离子型去污剂选自包括Nonidet P40、脱氧胆酸盐、Igepal CA 630和/或Triton-X 100的组。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，还包括将所述孵育的溶液离心并分离所述微生物的步骤。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，还包括在滤器上过滤所述孵育的溶液的步骤，所述滤器具有在所述滤器上截留微生物的孔径。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，还包括裂解所述微生物的步骤。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，还包括基于核酸的分子测定。

14.一种用于检测样品中的微生物的装置(1)，所述装置(1)包括：

用于接收体积低于40ml的样品流体的裂解室(2)，

与所述裂解室连接的，包含具有9.5或更高的pH的碱性缓冲液且包含非离子型去污剂的储存室(3)，或包含pH约9.5或更大的碱性缓冲液的储存室(31)和包含非离子型去污剂的储存室(32)，

与所述裂解室连接的用于过滤裂解样品的滤器(4)，所述滤器(4)具有在所述滤器上截留细菌的孔径，和

用于测定DNA的存在的检测室(5)。

15.根据权利要求14所述的装置，其中所述碱性缓冲液具有大于9.0的pKa和/或所述非离子型去污剂是Triton X-100。