[发明专利]肽展示阵列无效
| 申请号: | 201080055351.2 | 申请日: | 2010-12-07 |
| 公开(公告)号: | CN102648294A | 公开(公告)日: | 2012-08-22 |
| 发明(设计)人: | 马克·S·奇;伊戈·A·科兹洛夫 | 申请(专利权)人: | 普罗格诺西斯生物科学公司 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N33/50 |
| 代理公司: | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人: | 申基成;郑霞 |
| 地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 展示 阵列 | ||
1.一种阵列,所述阵列包括:
具有表面的基底;
在所述基底的所述表面上缔合的两个或多个单独的构建体,其中所述单独的构建体包括:
编码感兴趣的肽的寡核苷酸;和
所述感兴趣的肽;
其中所述寡核苷酸与所述基底表面缔合,且所述肽与所述寡核苷酸缔合。
2.一种阵列,所述阵列包括:
具有表面的基底;
在所述基底的表面上缔合的两个或多个单独的构建体,其中所述单独的构建体包括:
包括编码感兴趣的肽的区域、编码亲和标记物的区域和非翻译区的寡核苷酸;
包括所述感兴趣的肽和亲和标记物的肽;和
与所述亲和标记物选择性地结合的捕捉剂;
其中所述寡核苷酸与所述基底表面缔合,且所述肽通过所述亲和标记物与所述捕捉剂的结合与所述寡核苷酸缔合。
3.如权利要求2所述的阵列,其中所述非翻译区包括转录起始位点和核糖体结合位点。
4.如权利要求2所述的阵列,其中所述捕捉剂与所述寡核苷酸缔合。
5.如权利要求2所述的阵列,其中所述寡核苷酸经由连接物与所述基底表面缔合。
6.如权利要求2所述的阵列,其中所述捕捉剂与所述连接物缔合。
7.如权利要求2所述的阵列,其中所述基底是平面支持体。
8.如权利要求2所述的阵列,其中所述基底是珠子。
9.如权利要求2所述的阵列,其中所述寡核苷酸是双链的。
10.如权利要求2所述的阵列,其中所述寡核苷酸还包括用于将所述捕捉剂导入所述寡核苷酸的区域。
11.如权利要求10所述的阵列,其中所述区域经由连接物分子与所述寡核苷酸缔合。
12.一种构建阵列的方法,所述方法包括以下的步骤:
(a)提供包括两个或多个构建体的表面,所述构建体包括编码感兴趣的肽和亲和标记物的单链寡核苷酸区域;
(b)将所述单链寡核苷酸区域转化为双链寡核苷酸区域;
(c)将包括核糖体起始位点的非翻译区导入到所述双链寡核苷酸区域的5’端,其中所述非翻译区与具有和所述亲和标记物形成结合配对的能力的捕捉剂缔合;和
(d)使所述双链寡核苷酸区域进行转录和翻译事件以产生包括所述感兴趣的肽和所述亲和标记物的肽;
其中在步骤(d)中产生的蛋白在翻译后被所述构建体的所述捕捉剂捕捉,从而形成包括与编码所述肽的寡核苷酸缔合的所述肽的单独的构建体。
13.一种构建阵列的方法,所述方法包括以下的步骤:
(a)提供包括表面的基底,在所述表面上缔合了两个或多个构建体,所述构建体包括编码感兴趣的肽和亲和标记物的单链寡核苷酸;
(b)将第二通用寡核苷酸与所述构建体的所述寡核苷酸连接,其中所述通用寡核苷酸包括含核糖体结合位点的非翻译区;
(c)将捕捉剂经由与所述第二寡核苷酸杂交与所述寡核苷酸连系;
(d)将所述构建体的所述单链寡核苷酸区域转化为双链寡核苷酸区域;和
(e)使所述双链寡核苷酸进行转录和翻译事件以从所述双链寡核苷酸产生肽;
其中在步骤(e)中产生的蛋白被所述构建体的所述捕捉剂捕捉;且其中所得的阵列包括不连续的单元,所述不连续的单元包括与由核酸编码的所述肽缔合的所述核酸。
14.一种构建阵列的方法,所述方法包括以下的步骤:
(a)提供包括两个或多个构建体的表面,所述构建体包括具有作为编码感兴趣的肽和亲和标记物的序列的反向互补物的序列的单链寡核苷酸区域;
(b)将所述单链寡核苷酸区域转化为双链寡核苷酸区域;
(c)将包括核糖体起始位点的非翻译区导入到所述双链寡核苷酸区域的5’端,其中所述非翻译区与具有和所述亲和标记物形成结合配对的能力的捕捉剂缔合;和
(d)使所述双链寡核苷酸区域进行转录和翻译事件以产生包括所述感兴趣的肽和所述亲和标记物的肽;
其中在步骤(d)中产生的蛋白在翻译后被所述构建体的所述捕捉剂捕捉,从而形成包括与编码所述肽的寡核苷酸缔合的所述肽的单独的构建体。
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