[发明专利]TOLL‑样受体和激动剂用于治疗癌症的用途

说明书

技术领域

本发明涉及治疗癌症和传染病的方法。

背景技术

Toll-样受体负责识别细菌和病毒病原体的最常见模式。其激活导致先天性免疫应答以及随后的适应性免疫应答的募集。针对抗原存在部位的免疫系统的受体细胞是有效免疫应答中的关键步骤。这即是为何免疫参与不同类型佐剂的缘由。尽管大多数肿瘤表达肿瘤特异性抗原，但是它们正利用很多机制，以允许其逃避免疫识别。最近在小鼠模型中证明，通过TLR5配体和激动剂即细菌鞭毛蛋白来激活TLR5可对那些表达功能性TLR5的肿瘤引发抗肿瘤作用。这为考虑将TLR5激动剂用于癌症免疫疗法开启了一个常规机会。在将该概念还原到实践的途中存在两个主要障碍。第一，表达功能性TLR5的肿瘤的罕见发生率将该方法的适用性仅局限于少数肿瘤亚组。第二，全身性施用TLR5激动剂导致TRL5信号传导在所有细胞中激活，这些细胞含有进行未集中且非肿瘤特异性应答的功能性受体。因此，在现有技术中需要自分泌激活感染细胞或肿瘤细胞中的TLR受体信号传导且具有最低限度的全身作用从而能够引发特异性针对该感染细胞或肿瘤的先天性免疫应答的机制或方法。

发明内容

本发明可涉及载体，其包含第一核酸和第二核酸，其中所述第一核酸编码Toll-样受体，而所述第二核酸编码Toll-样受体激动剂。所述第一核酸可以编码Toll-样受体的分泌形式。所述第二核酸可以是鞭毛蛋白的分泌形式。所述Toll-样受体激动剂可以是鞭毛蛋白。所述载体可以是哺乳动物表达载体。所述载体可以从腺病毒、慢病毒或脂质体 表达。鞭毛蛋白的分泌形式可以是CBLB502S。Toll-样受体可以是TLR-5。

本发明可涉及在哺乳动物中治疗癌症的方法，包括向需要其的哺乳动物施用包含含第一和第二核酸的载体的药剂，其中所述第一核酸编码Toll-样受体，而所述第二核酸编码Toll-样受体激动剂。所述癌症可以是肿瘤。所述肿瘤可以源于前列腺、乳腺、结肠、食道、胃、肺、胰脏、肾、甲状腺、卵巢、咽喉或子宫颈。所述肿瘤可以源于肉瘤、黑素瘤、白血病和淋巴瘤。所述药剂可以从哺乳动物的肿瘤反位施用或者外部施用。所述药剂可以被直接施用到哺乳动物的肿瘤中。所述药剂可以与免疫刺激剂联合施用。所述免疫刺激剂可以选自生长激素、促乳素和维生素D。所述生长激素可以是促生长素。所述药剂可与细胞因子联合施用。所述细胞因子可以是干细胞因子。

本发明还涉及在哺乳动物中治疗感染的方法，包括向需要其的哺乳动物施用包含含第一和第二核酸的载体的药剂，其中所述第一核酸编码Toll-样受体，而所述第二核酸编码Toll-样受体激动剂。所述癌症可以是肿瘤。所述感染可以源于病毒、细菌、原生动物寄生虫(protozoan parasites)和真菌。

附图简述

图1A-1C描绘了表达TLR5、CBLB502S及其组合(TLR5+CBLB502S)的腺病毒载体的示意图。

图2描绘了在小鼠中，在用对照载体(无TLR5)或表达TLR5的载体转导的肿瘤细胞(A549)中多天内肿瘤体积比率的结果，其中小鼠用CBLB502或PBS处理三天。

图3描绘了通过注射包含共表达CBLB502S和Toll-样受体的载体的腺病毒引发的肿瘤生长抑制，其中该腺病毒被注射进同基因小鼠CT26结肠癌肿瘤中，并研究该腺病毒载体构建物的顺位和反位效应。

图4显示了细菌鞭毛蛋白的域结构。Ca骨架痕迹、疏水核分布和F41的结构信息。定义了结构域D1、D2a、D2b和D3的四种不同疏水核。所有疏水侧链原子显示有Ca骨架。侧链原子用颜色编码：Ala，黄色；Leu、He或Val，橙色；Phe和Tyr，紫色(碳原子)和红色(氧原 子)。鞭毛蛋白的氨基酸序列中的c位和多种结构特征的区域。从上到下显示的是：F41片段，蓝色；三个b-叶折叠(folium folds)，褐色；含a-螺旋的二级结构分布，黄色，b-结构，绿色，以及b-转角，紫色；每50个残基的tic标记，蓝色；结构域D1、D2a、D2b和D3；第一元件(proto-element)内的轴亚单位接触区域，蓝绿色；充分保守的氨基酸序列，红色，以及可变区，紫色；F41中产生不同超卷曲元件的点突变。底部的字母表示突变元件的形态学：L(D107E,R124A,R124S,G426A),L-型直链；R(A449V),R-型直链；C(D313Y,A414V,A427V,N433D),卷曲33。