[发明专利]含佐剂疫苗制剂

说明书

本发明涉及含佐剂疫苗（adjuvanted vaccine）制剂，尤其是能够增强粘膜免疫应答的流感疫苗，例如在鼻内或肌内递送后。

季节性流感仍然是全世界死亡率和发病率的主要原因之一。每年进行疫苗接种是预防和控制流感感染的最有效对策。季节性流感疫苗是基于对下一季节流行病的预期株的预测而制备的。也有一些不预防感染本身的肠胃外注射的疫苗，其能够减少感染后的严重性和复杂性。肠胃外的疫苗能够诱导在血清中中和IgG抗体，但是它们不能诱导在粘膜的表面起作用的分泌型IgA抗体。相比之下，鼻内（i.n.）疫苗可诱导全身性免疫应答和粘膜免疫应答。在粘膜的膜表面上的分泌型IgA抗体对于预防感染是十分有效的，因为它们在病原体附着到上皮细胞表面（其是流感病毒感染的第一个靶点）之前在粘膜的膜表面上起作用。此外，血清IgG抗体针对漂移病毒株（drifted viral strain）不是那么有效，因为它们与分泌型IgA抗体相比具有更高的特异性。分泌型IgA抗体针对流感病毒的变异株具有交叉保护的作用。IgA的交叉反应作用的精确机制仍然是未知的，但是该现象在预防感染中是很大的优势。流感显示出改变其两种主要膜蛋白，血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的抗原特性的非凡能力。这通过在远离于人类人群中建立的适应性免疫应答的连续选择而发生。由于该病毒的高突变率，特定的疫苗制剂通常只在约一年内有作用。世界卫生组织每年整理疫苗的目录，以包括最有可能在第二年发起攻击的病毒株。现今，常规疫苗是由三种灭活的流感病毒（两种A-株和一种B株）所构成的疫苗。每年基于由WHO预期会在即将到来的流感季节中流行的流感株而重新配制这种三价流感疫苗。例如，在2007-2008年，该每年更新的三价流感疫苗由来自流感H3N2、H1N1和B流感病毒的血凝素（HA）表面糖蛋白组分组成。

疫苗i.n.递送的其他优势在于，疫苗的递送不需要受过训练的卫生保健人员来进行疫苗的给药，这使得这种类型的疫苗适于患有针恐怖症（needle-phobia）的人群并且防止针刺损伤问题的发生。而且，有报道称粘膜免疫系统在生命中发育较早且不受老化的影响（McElhaney JE.Vaccine 2005 Jul 8;23Suppl 1:S10-25;Szewczuk MR et al.Ann N Y Acad Sci 1983 Jun 30;409:333-44）。因此，例如鼻内流感免疫的伴生优势在于，它能够在所有年龄段中潜在提供有效免疫，并且能够用于大规模疫苗接种。人们已经对经由鼻或口咽途径对抗流感以及利用灭活流感抗原的免疫法的各种概念进行了研究以作为对于皮下或肌肉注射免疫的更少使用针的其他选择方案。对于支持更少地使用针的方法的试验数据已经在动物模型中产生。由动物数据支持的利用灭活的流感抗原（如化学灭活整个病毒粒子，或进一步处理的病毒组分如裂解病毒，或纯化的表面抗原血细胞凝集素（HA）和/或神经氨酸酶（NA）处理）经鼻内途径用于免疫的构思包括与灭活的流感抗原联合使用佐剂或免疫刺激物，或需要多疫苗接种。佐剂是增强与其混合的抗原的免疫原性的任何物质。在人类中，经由鼻内途径抗流感的成功疫苗接种仅报道了（a）活（冷适应株）流感疫苗（FluMist^TM，Medlmmune Vaccines Inc）、（b）用大肠杆菌（E.coli）的不耐热毒素（heat labile toxin）作为佐剂的类病毒体（virosomal）流感疫苗（NasalFlu，Berna Biotech Ltd）或（c）利用大量抗原病且重复接种。虽然活疫苗能够诱导令人满意的免疫反应，但它们作为活病毒的特定性质会引起另外的安全考虑，并且可能会由于要求在上呼吸道附近发生病毒复制而诱导副作用。此外，其所要求的存储条件正在限制这些产品的商品化。大肠杆菌HLT作为佐剂的鼻内流感疫苗的使用与面瘫（贝尔麻痹）之间的密切联系导致HLT作为佐剂的类病毒体疫苗退出市场。

目前，活的减弱的流感病毒疫苗（LAIV）已上市以用于i.n.给药。LAIV疫苗已经显示出既诱导全身免疫反应又诱导粘膜免疫反应。然而，FDA批准LAIV疫苗仅用于年龄为2-49岁的人，而不能用于高危人群（老年人、儿童以及长期患病的患者）（美国国家疾病控制与预防中心（Centers for Disease Control and Prevention）