[发明专利]病毒瓜氨酸肽和其应用

说明书

发明领域

本发明涉及来自爱泼斯坦－巴尔二氏（Epstein Barr）病毒的新瓜氨酸合成肽，和其在诊断和治疗自身免疫疾病，特别是类风湿性关节炎（RA）中的应用。

背景技术

在广泛的发炎性关节病范围内，类风湿性关节炎（RA）处于突出位置。通过在小和大关节上产生系统性和破坏性炎症，RA造成疼痛和关节损伤，最终导致畸形和残疾。

多种自体抗体的出现是RA的标记。最著名的是类风湿因子（RF），这是针对免疫球蛋白IgG同种型Fc区的IgG或IgM类抗体。约70-80%类风湿性关节炎患者是RF血清阳性，但是RF也出现在慢性感染、淋巴增生疾病、其他风湿疾病和接近20%老年健康个体中。因此，鉴于对RA的RF特异性有限，要寻找其他更特异的抗体。APF（抗核周因子）抗体和AKA（抗角蛋白抗体）明确显示具有高度疾病特异性。

后来发现APF抗体和AKA识别的抗原是通过将精氨酸修饰为瓜氨酸残基而在翻译后产生的含瓜氨酸蛋白。开发出使用衍生自丝聚蛋白的合成瓜氨酸肽（CP）的ELISA[G.A.Schellekens等.J.Clin.Invest.1998，101，273]。为增加检测的敏感性，将CP修饰成环瓜氨酸肽（CCP）结构，其中瓜氨酸部分最佳暴露用于抗体结合[国际申请号WO1998022503]。在所谓CCP1检测中[G.A.Schellekens等.Arthritis Rheum.2000，43，155]，抗体在68%的RA患者血清中检测到，特异性为单个CCP98%。近期研究表明第二代CCP检测CCP2[J.Avouac等.Ann.Rheum.Dis.2006，65，845]的敏感性和特异性高，显示68%（39-94%范围）敏感性，95%（81-100%范围）特异性。近来，INOVA开发出第三代检测[L.Lutteri等.Clin.Chim.Acta 2007，386，76]，并且声称是更加敏感的抗CCP ELISA，保持98％的敏感性。这些ELISA检测都市售可得（ED公司（Euro-Diagnostica），荷兰阿纳姆；轴盾公司（Axis-Shield），苏格兰敦提；INOVA，美国圣地亚哥）。

另外，提交了多个涉及基于瓜氨酸蛋白/肽检测RA病人中抗体的方法的专利申请[US20020143143，US20070087380，EP1946109，US20070148704，WO2009007846，WO2009000077，WO2007017556，EP1456662，WO 1999028344，WO2008132264]。

多种瓜氨酸蛋白已在RA滑膜，即血管外瓜氨酸纤维蛋白[C.Masson-Bessière等.J.Immunol.2001，166，4177]、胶原蛋白II[H.Burkhardt等.Eur.J.Immunol.2005，35，1643]和巨噬细胞波形蛋白[E.R.Vossenaar等.Arthritis Rheum.2004，50，3485]中描述。尽管丝聚蛋白在滑膜不表达，其瓜氨酸衍生物用于检测抗CP抗体[US20090028885，US 7,445,903，US6,890,720]。