[发明专利]电泳分析方法有效
| 申请号: | 201080051899.X | 申请日: | 2010-11-17 |
| 公开(公告)号: | CN102612650A | 公开(公告)日: | 2012-07-25 |
| 发明(设计)人: | 盐田一磨;藤田智大 | 申请(专利权)人: | 合同酒精株式会社 |
| 主分类号: | G01N33/483 | 分类号: | G01N33/483;C12N9/54;G01N27/447 |
| 代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 苗堃;金世煜 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 电泳 分析 方法 | ||
1.一种含有蛋白酶的试样的电泳分析方法,其特征在于,将含有被分析对象蛋白酶的试样置于该蛋白酶迅速失活的pH条件后,使该试样进行电泳。
2.如权利要求1所述的分析方法,其中,所述蛋白酶迅速失活的pH条件为从该蛋白酶的最适pH偏离3以上的pH条件。
3.如权利要求1或2所述的分析方法,其中,当所述蛋白酶为中性蛋白酶时,该蛋白酶迅速失活的pH条件为pH0.1~3或pH11~14,当所述蛋白酶为酸性蛋白酶时,该蛋白酶迅速失活的pH条件为pH10~14,当所述蛋白酶为碱性蛋白酶时,该蛋白酶迅速失活的pH条件为0.1~4。
4.如权利要求1~3中任一项所述的分析方法,其中,所述蛋白酶为中性金属蛋白酶,该蛋白酶迅速失活的pH条件为pH0.7~2.0或12~14。
5.如权利要求1~4中任一项所述的分析方法,是分析蛋白酶纯度的方法。
6.如权利要求1~5中任一项所述的分析方法,其中,电泳为十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳即SDS-PAGE或毛细管电泳。
7.如权利要求1~6中任一项所述的分析方法,其中,所述蛋白酶为满足如下条件的蛋白酶:(1)由属于类芽孢杆菌属的细菌产生;(2)在中性范围分解酪蛋白、血红蛋白;(3)最适pH为7.0~8.0,在pH5.5~9.0稳定;(4)在20~75℃进行作用,最适温度为55℃;(5)由电泳法获得的分子量推定为32000~34000Da;
并且,该蛋白酶迅速失活的pH条件为pH0.7~2.0或12~14。
8.一种蛋白酶,是利用权利要求1~7中任一项所述的分析方法确认到具有92%以上的纯度的满足如下条件的蛋白酶:(1)由属于类芽孢杆菌属的细菌产生;(2)在中性范围分解酪蛋白、血红蛋白;(3)最适pH为7.0~8.0,在pH5.5~9.0稳定;(4)在20~75℃进行作用,最适温度为55℃;(5)由电泳法获得的分子量推定为32000~34000Da。
9.如权利要求8所述的蛋白酶,其中,纯度为95%以上。
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