[发明专利]具有改良比活和/或热稳定性的葡糖淀粉酶的组合变体

权利要求书

1.包含氨基酸取代的葡糖淀粉酶变体，所述氨基酸取代对应于SEQ ID NO：2的位置：

(a)61，417，431和539；

(b)43，417，431，535和539；或

(c)73，503和563，

或者对应于亲本葡糖淀粉酶的等价位置，其中，葡糖淀粉酶变体与SEQ ID NO：1或2、或该亲本葡糖淀粉酶有至少80％序列同一性。

2.权利要求1的葡糖淀粉酶变体，其中氨基酸取代是：

(a)N61I，L417G/R/V，A431L/Q和A539R；

(b)I43Q/R，L417G/R/V，A431L/Q，A535R和A539R；或

(c)G73F，E503V和N563K。

3.权利要求1或权利要求2的葡糖淀粉酶变体，所述变体在SEQ ID NO：2的相关位置或在亲本葡糖淀粉酶中的等价位置上包含以下取代集合之一：

N611/L417V/A431L/A539R；

I43Q/N611/L417V/A431L/A539R；

N61I/L417V/A431L/A535R/A539R

I43Q/L417V/A431L/A535R/A539R；

I43Q/N61I/L417V/A431L/A535R/A539R；

I43Q/N61I/L417V/T430A/A431L/A535R/A539R；

I43Q/L417V/T430A/A431L/Q511H/A535R/A539R/N563I；

N61I/L417V/T430A/A431L/Q511H/A535R/A539R/N563I；

I43Q/N61I/L417V/T430A/A431L/Q511H/A535R/A539R/N563I；

I43R/N61I/L417V/A431L/A539R；

I43R/N61I/L417V/T430A/A431L/A535R/A539R；

G73F/L417R/E503V/A539R/N563K；

I43R/G73F/L417R/E503V/A539R/N563K；和

I43R/G73F/E503V/Q511H/N563K。

4.权利要求1至3之任一的葡糖淀粉酶变体，其中亲本葡糖淀粉酶或葡糖淀粉酶变体具有与SEQ ID NO：1，2，3，5，6，7，8或9有至少80％序列同一性的催化结构域。

5.权利要求1至4之任一的葡糖淀粉酶变体，其中亲本葡糖淀粉酶或葡糖淀粉酶变体具有与SEQ ID NO：1，2，11，385，386，387，388，389或390有至少95％的序列同一性的淀粉结合结构域。

6.权利要求1至5之任一的葡糖淀粉酶变体，其中葡糖淀粉酶变体与SEQ ID NO：1或2具有至少85％的序列同一性。

7.权利要求6的葡糖淀粉酶变体，其中葡糖淀粉酶变体与SEQ ID NO：1或2具有至少90％的序列同一性。

8.权利要求7的葡糖淀粉酶变体，其中葡糖淀粉酶变体与SEQ ID NO：1或2具有至少95％的序列同一性。

9.权利要求8的葡糖淀粉酶变体，其中葡糖淀粉酶变体与SEQ ID NO：1或2具有至少99.5％的序列同一性。

10.权利要求1至3之任一的葡糖淀粉酶变体，其中亲本葡糖淀粉酶包含SEQ ID NO：1或2。

11.权利要求10的葡糖淀粉酶变体，其中亲本葡糖淀粉酶由SEQ ID NO：1或2组成。

12.上述权利要求之任一的葡糖淀粉酶变体，其中葡糖淀粉酶变体包含一个或多个另外的氨基酸取代，对应于SEQ ID NO：2的43，44，61，73，294，430，503，511，535或563位，或亲本葡糖淀粉酶中的等价位置。

13.权利要求12的葡糖淀粉酶变体，其中氨基酸取代是SEQ ID NO：2的I43Q/R，D44C/R，N61I，G73F，G294C，T430A/M，E503A/V，Q511H，A535R或N563I/K，或亲本葡糖淀粉酶中的等价位置。