[发明专利]用于引发特异性免疫应答以治疗病毒感染和其他病症的具有肽佐剂的疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及疫苗开发领域：特别涉及肽佐剂在疫苗中促进和增强为了预防性治疗或治疗性治疗感染或疾病而施用该疫苗的受治疗者体内的免疫应答的用途。

背景

疫苗被用来引发对特定靶抗原的特异性免疫应答。例如，使用针对病毒或细菌组分的疫苗以防止或限制由各自的病原体引起的感染。针对肿瘤特异性抗原或这些抗原的组合的疫苗用于癌症治疗。但是，对于未接触抗原的(unprimed)免疫系统来讲，靶抗原在独立地刺激特异性免疫应答方面通常不理想，尤其在疫苗中的免疫抗原是分离的或合成的肽的情况下。为克服这点，商业化的疫苗制剂通常不仅包含靶抗原，而且包含免疫佐剂。

佐剂可以若干方式中的一种或多种促进改善的免疫应答：例如，促进抗原递送至抗原递呈细胞或促进抗原递呈细胞的活化、刺激淋巴细胞、诱导炎症细胞的局部流入或提供持久抗原库。特异性佐剂可促进Th1(细胞的)或Th2(体液的)应答的极化，并增加免疫应答的强度或持久性。

由铝盐(氢氧化铝或磷酸铝)制成的佐剂在针对多种传染病的预防性疫苗中的广泛使用已持续了几十年。其促进Th2调控的免疫应答，其中体液(抗体)组分的作用超过细胞组分。随着高度纯化的蛋白质和亚单位疫苗以及基于DNA的疫苗的到来，对开发有效且耐受性良好的疫苗佐剂的兴趣重新开始。对于已有的疫苗，改进的佐剂可允许每剂量使用更少量的免疫原—可能将免疫覆盖扩展至全球人口的更广泛部分。

由于癌症导致树突状细胞成熟和功能损伤，正在寻求用于为治疗癌症而设计的疫苗的新佐剂。这有损抗原递呈，且也可能与免疫抑制调节性T细胞的活化有关。Melacine(以黑色素瘤中的肿瘤抗原CHER-2/neu和L523S为靶的疫苗)包含佐剂ASO4，ASO4是单磷酰脂A衍生物MPL和铝盐的组合。在欧洲已被批准为乙型肝炎疫苗的Fendrix^TM(Boland等人，Vaccine 2004，23：316-320)中，ASO4也用作佐剂。

在70％至90％的年龄在65岁以下的成人中，灭活的流感疫苗减少了实验室确认的流感的发生—但在超过65岁的人群中，当传播株和疫苗株之间的抗原匹配最佳时，疫苗功效估计范围43-56％，且当菌株的抗原性多样化时，疫苗功效仅21-42％。这是个相当大的问题，因为在老年人中流感的发病率和死亡率是特别严重的。

最近，已给予了流感疫苗Fluad的海外监管批准，Fluad用佐剂MF-59^TM配制，MF-59^TM是一种由鲨烯和两种类型的表面活性剂组成的水包油型乳液。与标准流感疫苗相比，Fluad可引发更强的体液(抗体)应答。接受Fluad的年长患者在病毒传播高峰期间需要住院治疗的可能性明显较低(Joan Puig-Barberà等人，Vaccine 25(2007)7313-7321)。然而，尽管通常MF-59的耐受性非常好，与常规疫苗相比其还与身体不适和局部疫苗反应明显增加有关(Minutello等人，Vaccine 1999年1月；17(2)：99-104)。

以前的包含肽的疫苗组合物

Chedid等人(Infect Immun.1982年2月；35(2)：417-24)描述了合成胞壁肽佐剂的生物学活性。美国专利4,094,971提供了水溶性产品，当以不含油的水溶液对宿主施用时，认为该产品具有体内免疫活性。该产品是具有N-酰基胞壁酰和N-乙酰葡糖胺糖单位的酰基化肽聚糖片段。美国专利4,094,971提供了水溶性产品，当以不含油的水溶液对宿主施用时，认为该产品具有体内免疫活性。

更近一些，Schmidt等人做了通过将用外源Ⅰ类主要组织相容性复合物肽配体转接肿瘤细胞开发癌症疫苗的实验(Proc Natl Acad Sci U S A.1996年9月3日；93(18)9759-63)。Reidl等人(Eur J Immunol.2002年6月；32(6)1709-16)已报道免疫刺激性寡肽和来自病毒核心抗原的阳离子肽的结合增强了其作为佐剂的效力。美国专利申请US 2009/0123486A1概述了具有抗原和富含带正电天然和/或非天然氨基酸残基，特别是赖氨酸和亮氨酸的组合的肽的疫苗。