[发明专利]5-FU的检测方法

说明书

技术领域

本发明一般涉及诊断试验，特别是在患者样品中对于试验的组合物和诊断方法。

背景技术

5-氟尿嘧啶(5-FU)是在癌症治疗中最重要的化疗药物之一。通常用于直肠癌，胃癌，乳腺癌和胰腺癌的各种化疗方案。例如，5-FU单独或者联合疗法比如FOLFOX和FOFIRI是在转移性直肠癌中的标准一线疗法。但是，5-FU常常伴随严重的副作用包括骨髓抑制，粘膜炎，皮炎，腹泻，心脏毒性甚至死亡。这些副作用至少在某种90程度上是由现有的对单个患者的剂量测定方法导致的。现行标准治疗中剂量的决定方法-体表面积(BSA)仅仅考虑了患者的身高和体重。BSA没有考虑许多影响5-FU代谢和效力的因素比如基因型、年龄、性别、疾病状态、药物相互作用、器官功能、和合并症。因此，尽管是基于BSA的相同剂量给药，不同患者的5-FU血药浓度有超过10倍的差别也就不足为奇。

最近的学术研究表明，基于血浆5-FU浓度的药物动力学监测的个体5-FU剂量调整可导致对5-FU的客观反应率的显著提高。例见Gemelin et al.J.Clin.Oncol.，26(13)：2099-2105(2008)；Climente-Marti et al.，J.Pharmaceut.Sci.，92(6)：1155-1165(2003)；Milano et al.，Int.J.Cancer，41：537-541(1988)。这些研究表明接受5-FU治疗的个体患者中的5-FU血液浓度的临床检测对于5-FU剂量调整、疗效优化和减少严重不良反应无疑是需要的。

发明概述

本发明提供了了一种在患者样品中检测5-氟尿嘧啶的方法。

第一方面，提供了在从接受了5-FU和可选的其它药物的患者取得的样品中检测5-FU的方法。该方法中，从摄入5-FU的患者中取得样品，然后该样品与二氢嘧啶脱氢酶(DPD)灭活剂混合，而后在该样品中特别是与DPD灭活剂混合的状态下测定5-FU的量。

另一方面，本发明提供了一种用5-FU治疗患者的方法，包括以下步骤：给予患者第一剂5-氟尿嘧啶；测量取自该摄入5-FU患者的样品中的5-FU含量，其中所述的样品在体外掺入一种DPD灭活剂形成混合物，其中所述样品中5-FU的量最好是在有灭活剂存在的情况下测得的；然后给予该患者第二剂5-FU。第二剂给予5-FU的量是根据患者样品中所测量的5-FU水平并基于预设最佳或目标5-FU AUC来决定的。

本发明也为5-FU检验提供了一种处理接受了5-FU并可选择地的其它药物疗法患者的血液样品的方法。在一实施方案中，该方法包括以下步骤：从摄入5-FU的患者中获得含有5-FU的血液样品；从血样中分离出血浆；在分离血浆中添加DPD灭活剂以组成混合物；然后将混合物送往实验室进行混合物中5-FU水平的分析试验。

在另一实施方案中，该方法包括以下步骤：从摄入5-FU的患者中获得含有5-FU的血液样品；在血样中添加DPD灭活剂以组成混合物；然后从混合物中分离出含有5-氟尿嘧啶和灭活剂的血浆。由此获得的血浆可送往实验室进行5-FU检验。

在另一种实施方案中，处理注入5-FU的患者的血液样品的方法需要以下步骤：从患者中获得含有5-FU的血液样品；在血样中添加DPD灭活剂以组成混合物；然后将混合物送往实验室进行5-FU检验。

本发明的另一方面，提供了一种组合物，包括从摄入了5-FU的患者中分离的、混有二氢嘧啶脱氢酶灭活剂的样品，这里所说的样品是血液或血浆或血清，而灭活剂在组合物中的浓度至少为850ng/ml。

另一方面，本发明提供了一个试剂盒包括以下成分在一个容器内：(a)从摄入了5-FU的患者中分离的、混有浓度至少为850ng/ml的二氢嘧啶脱氢酶灭活剂的样品；(b)将该样品降温至10oC以下的手段。

在本发明的各个方面中，最好样品从上述患者中分离出来后5到10个小时之内不冷冻。灭活剂的例子包括，例如，嘧啶或者吡啶衍生物，特别是尿嘧啶类似物比如恩尿嘧啶(eniluracil)和吉美拉西(Gimeracil)。样品中的5-FU可通过任何已知的技术来检验，比如，HPLC、Mass-Spec(质谱)、或使用抗5-FU抗体的免疫分析。