[发明专利]用于产生富含多不饱和脂肪酸的油的新Δ9-延伸酶

权利要求书

1.一种包含分离的核苷酸序列或与所述分离的核苷酸序列互补的分离的核酸分子或其片段，所述分离的核苷酸序列编码具有延伸酶活性的多肽，其中所述多肽的氨基酸序列与选自SEQ ID NO：18和SEQ ID NO：20的氨基酸序列具有至少68％序列同一性。

2.一种包含选自SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：19的核苷酸序列的至少68％或与之互补的分离的核苷酸序列或其片段。

3.权利要求1或2的分离的核苷酸序列，其中所述分离的核苷酸序列编码利用多不饱和脂肪酸作为底物的功能上活性的延伸酶。

4.权利要求1或2的分离的核苷酸序列，其中所述分离的核苷酸序列来自类眼虫属物种（Euglenoid sp.）。

5.权利要求4的分离的核苷酸序列，其中所述分离的核苷酸序列来自Euglena deses Ehr.  CCMP 2916。

6.一种纯化多肽，其由权利要求1或2的分离的核苷酸序列编码。

7.一种纯化多肽，其延伸在碳9位置上含有不饱和的多不饱和脂肪酸，且与选自SEQ ID NO：18和SEQ ID NO：20的氨基酸序列具有至少68％氨基酸同一性。

8.一种表达载体，其包含与调节序列可操作地连接的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列包含选自SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：19的核苷酸序列的至少68％或与之互补。

9.一种宿主细胞，其包含权利要求8的表达载体。

10.权利要求9的宿主细胞，其中所述宿主细胞选自真核细胞和原核细胞。

11.权利要求10的宿主细胞，其中所述真核细胞选自：哺乳动物细胞、昆虫细胞、植物细胞和真菌细胞。

12.权利要求11的宿主细胞，其中所述植物细胞来自选自下述的油料种子植物：大豆、芸苔属物种、红花、向日葵、玉蜀黍、棉花和亚麻。

13.一种包含权利要求8的表达载体的植物细胞、植物种子、植物或植物组织，其中所述表达载体的核苷酸序列的表达导致通过所述植物细胞、植物种子、植物或植物组织产生至少一种多不饱和脂肪酸。

14.权利要求13的植物细胞、植物种子、植物或植物组织，其中所述多不饱和脂肪酸选自ω6-二十碳二烯酸（ω6-EDA）、ω3-二十碳三烯酸（ω3-ETrA）及其组合。

15.一种产生Δ9-延伸酶的方法，所述方法包含步骤：

a）分离包含选自SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：19的核苷酸序列的至少68％或与之互补的核苷酸序列；

b）构建包含与ii）调节序列可操作地连接的i）分离的核苷酸序列的表达载体；和

c）在足以产生Δ9-延伸酶的时间和条件下，将所述表达载体引入宿主细胞内。

16.权利要求15的方法，其中所述宿主细胞选自真核细胞和原核细胞。

17.权利要求16的方法，其中所述真核细胞选自哺乳动物细胞、昆虫细胞、植物细胞和真菌细胞。

18.权利要求17的方法，其中所述植物细胞来自选自大豆、芸苔属物种、红花、向日葵、玉蜀黍、棉花和亚麻的油料种子植物。

19.一种用于产生多不饱和脂肪酸的方法，其包含步骤：

a）分离包含选自SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：19的核苷酸序列的至少68％或与之互补的核苷酸序列；

b）构建包含与ii）调节序列可操作地连接的i）分离的核苷酸序列的表达载体；

c）在足以表达Δ9-延伸酶的时间和条件下，将所述表达载体引入宿主细胞内；和

d）使所表达的Δ9-延伸酶暴露于底物多不饱和脂肪酸，以便将所述底物多不饱和脂肪酸转换为第一种产物多不饱和脂肪酸。

20.权利要求19的方法，其中所述底物多不饱和脂肪酸是亚油酸（LA），并且所述第一种产物多不饱和脂肪酸是ω6-二十碳二烯酸（ω6-EDA）。