[发明专利]真菌蛋白酶及其用途

权利要求书

1. 一种真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶具有丝氨酸蛋白酶活性，并且包含如SEQ ID NO:10中定义的成熟Tr Prb1酶的氨基酸序列或其具有相似性质的变体，其中所述酶可在低温或中等温度应用于修饰、降解或去除蛋白质性质的材料。

2. 根据权利要求1的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶可作为去垢剂添加剂应用。

3. 根据权利要求1或2的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶可得自丝状真菌木霉属。

4. 根据权利要求1 – 3中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶具有丝氨酸蛋白酶活性，并且包含所述氨基酸序列SEQ ID NO:10。

5. 根据权利要求1 – 4中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于成熟形式的所述酶具有25 - 35 kDa的分子质量。

6. 根据权利要求1 – 5中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于使用15分钟反应时间和酪蛋白作为底物，所述酶在pH 9的最适温度是30℃ - 70℃。

7. 根据权利要求1 – 6中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于使用15分钟反应时间和酪蛋白作为底物，所述酶在50℃具有在至少pH 6 – pH 11的pH范围的最适pH。

8. 根据权利要求1 – 7中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶能够在10℃ - 60℃在去垢剂的存在下降解且去除蛋白质性质的污物。

9. 根据权利要求1 – 8中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶由分离的核酸分子编码，所述分离的核酸分子编码包含特征在于SEQ ID NO:10的氨基酸序列或其具有相似性质的变体的多肽。

10. 根据权利要求1 – 9中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶由包含核苷酸序列SEQ ID NO:9的分离的核酸分子编码。

11. 根据权利要求1 – 10中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶由包括在pALK2650中的多核苷酸序列SEQ ID NO:5编码，所述pALK2650在登记号DSM 22635下保藏于大肠埃希氏菌RF8052中。

12. 根据权利要求1 – 11中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶由包含与调节序列可操作地连接的核酸分子的重组表达载体产生，所述核酸分子编码根据权利要求1 – 11中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，所述调节序列能够指导所述丝氨酸蛋白酶编码基因在合适宿主中的表达。

13. 根据权利要求1 – 12中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶在异源宿主中产生。

14. 根据权利要求1 – 13中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶在微生物宿主中产生。

15. 根据权利要求1 – 14中任一项的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶在木霉属、曲霉属、镰刀菌属、腐质霉属、金孢属、链孢霉属、根霉属、青霉属和被孢霉属的宿主中产生。

16. 根据权利要求15的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶在木霉属或曲霉属中产生。

17. 根据权利要求16的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述酶在里氏木霉中产生。

18. 一种编码真菌丝氨酸蛋白酶的分离的核酸分子，所述酶可在低温或中等温度应用于修饰、降解或去除蛋白质性质的材料，所述核酸分子选自下述：

（a）编码具有丝氨酸蛋白酶活性且包含如SEQ ID NO:10中所述的氨基酸序列或其具有相似性质的变体的多肽的核酸分子；

（b）包含如SEQ ID NO:9中所述的多核苷酸序列的核酸分子；

（c）包含在DSM 22635中含有的多核苷酸序列SEQ ID NO:5的编码序列的核酸分子；

（d）由于遗传密码的简并性，其多核苷酸序列不同于（b）-（c）的核酸分子的多核苷酸序列的核酸分子。

19. 根据权利要求18的真菌丝氨酸蛋白酶，其特征在于所述真菌丝氨酸蛋白酶可作为去垢剂添加剂应用。