[发明专利]具有纤维素分解增强活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸有效

专利信息
申请号: 201080039731.7 申请日: 2010-07-07
公开(公告)号: CN102597243A 公开(公告)日: 2012-07-18
发明(设计)人: 段俊欣;汤岚;刘晔;吴文平;J.奎因兰;R.克拉默 申请(专利权)人: 诺维信股份有限公司;诺维信公司
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;C12N9/24
代理公司: 北京市柳沈律师事务所 11105 代理人: 史悦
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 具有 纤维素 分解 增强 活性 多肽 编码 多核苷酸
【权利要求书】:

1.一种具有纤维素分解增强活性的分离的多肽,其选自下组:

(a)多肽,其与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%或100%序列同一性;

(b)由多核苷酸编码的多肽,所述多核苷酸在高严格条件或非常高严格条件下与以下杂交:(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列,(ii)包含于SEQ IDNO:1的成熟多肽编码序列中的cDNA序列,或(iii)(i)或(ii)的全长互补链;

(c)由多核苷酸编码的多肽,所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%或100%序列同一性;

(d)SEQ ID NO:2的成熟多肽的包含取代、缺失和/或插入一个或多个(几个)氨基酸的变体;和

(e)(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的具有纤维素分解增强活性的片段。

2.权利要求1的多肽,所述多肽由质粒pGEM-T-Ppin7中所含的多核苷酸编码,所述质粒pGEM-T-Ppin7包含在大肠杆菌DSM 22711中。

3.一种组合物,其包含权利要求1或2的多肽。

4.一种分离的多核苷酸,其编码权利要求1或2的多肽。

5.一种重组宿主细胞,其包含与一个或多个调控序列可操作地连接的权利要求4的多核苷酸,所述调控序列指导所述多肽的产生。

6.一种产生权利要求1或2的多肽的方法,其包括:

(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养细胞,所述细胞以其野生型形式产生所述多肽;和

(b)回收所述多肽。

7.一种产生具有纤维素分解增强活性的多肽的方法,其包括:

(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养权利要求5的宿主细胞;和

(b)回收所述多肽。

8.一种转基因植物、植物部分或植物细胞,其经编码权利要求1或2的多肽的多核苷酸转化。

9.一种产生具有纤维素分解增强活性的多肽的方法,其包括:

(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养权利要求8的转基因植物或植物细胞;和

(b)回收所述多肽。

10.一种双链抑制RNA(dsRNA)分子,其包含权利要求4的多核苷酸的亚序列,其中任选地所述dsRNA是siRNA或miRNA分子。

11.一种抑制具有纤维素分解增强活性的多肽在细胞中表达的方法,其包括对所述细胞施用权利要求10的双链抑制RNA(dsRNA)分子,或者在所述细胞中表达权利要求10的双链抑制RNA(dsRNA)分子。

12.一种分离的多核苷酸,其编码信号肽,所述信号肽包含SEQ ID NO:2的氨基酸1至21或由SEQ ID NO:2的氨基酸1至21组成。

13.一种产生蛋白质的方法,其包括:

(a)在有助于所述蛋白质产生的条件下培养包含权利要求12的多核苷酸的重组宿主细胞,其中所述基因对于编码信号肽的多核苷酸是外源的;和

(b)回收所述蛋白质。

14.一种用于降解或转化纤维素材料的方法,其包括:在权利要求1或2的具有纤维素分解增强活性的多肽存在下,用酶组合物处理纤维素材料。

15.权利要求14的方法,进一步包括回收已降解的纤维素材料。

16.一种产生发酵产物的方法,其包括:

(a)在权利要求1或2的具有纤维素分解增强活性的多肽存在下,用酶组合物糖化纤维素材料;

(b)用一种或多种发酵微生物发酵经糖化的纤维素材料以产生发酵产物;和

(c)从所述发酵中回收所述发酵产物。

17.一种发酵纤维素材料的方法,其包括:用一种或多种发酵微生物发酵纤维素材料,其中在权利要求1或2的具有纤维素分解增强活性的多肽的存在下用酶组合物糖化所述纤维素材料。

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