[发明专利]用于通过过量表达胞外多糖质构化食品的具有修饰的半乳糖激酶表达的乳酸细菌

权利要求书

1.一种制造乳酸细菌的方法，其包括：

a)提供乳酸细菌菌株(母菌株)；和

b)在所述菌株的GalK基因中引入突变。

2.根据前述权利要求所述的制造乳酸细菌的方法，所述乳酸细菌在发酵奶中比母菌株产生更高的粘度(例如以在37℃下生长12小时后的剪切应力度量)，所述方法包括：

a)提供乳酸细菌菌株(母菌株)；和

b)在所述菌株的GalK基因中引入突变。

3.根据任一前述权利要求所述的制造乳酸细菌的方法，所述乳酸细菌在发酵奶中产生大于约70Pa的粘度(例如以在37℃下生长12小时后的剪切应力度量)，所述方法包括：

a)提供乳酸细菌菌株(母菌株)；和

b)在所述菌株的GalK基因中引入突变。

4.根据任一前述权利要求所述的方法，其包括一个或多个选自以下组的其它步骤：

c1)筛选产生质构的突变株，例如产生比母菌株更高的质构性或增加奶底物的粘度的菌株；和

c2)筛选具有Gal+表型、例如与母菌株相比具有提高的半乳糖降解/发酵活性的突变株。

5.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述突变被引入所述基因的启动子区域中。

6.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述突变被引入所述基因的-10区域(Pribnow盒)中。

7.根据前述权利要求所述的方法，其中所述突变导致野生型-10区域(TACGAT，SEQ ID NO：1)中的C和G之一或两者被独立选自由A和T组成的组的核苷酸替换。

8.根据前述权利要求所述的方法，其中所述突变导致野生型-10区域(TACGAT，SEQ ID NO：1)中的C被独立选自由A和T组成的组的核苷酸替换。

9.根据前述权利要求所述的方法，其中所述突变导致野生型-10区域(TACGAT，SEQ ID NO：1)中的C被T替换。

10.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述突变产生具有核苷酸序列TATGAT(SEQ ID NO：2)、TATTAT(SEQ ID NO：3)或TACTAT(SEQ ID NO：4)的-10区域。

11.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述突变使用基因工程技术引入。

12.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述突变使用诱变技术，例如通过辐射或用化学剂处理而引入，任选地随后对GalK基因进行分析以检验GalK基因中的突变。

13.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述细菌属于嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)种。

14.一种乳酸细菌，其通过任一前述权利要求的方法获得。

15.一种乳酸细菌，其在发酵奶中产生大于约70Pa(例如大于73Pa)的粘度，例如以在37℃下生长12小时后的剪切应力度量。

16.一种乳酸细菌，其在GalK基因的-10区域中携带突变(与野生型-10区域(TACGAT，SEQ ID NO：1)相比)，其中所述突变产生具有核苷酸序列TATGAT(SEQ ID NO：2)、TATTAT(SEQ ID NO：3)或TACTAT(SEQ ID NO：4)的-10区域。

17.一种乳酸细菌，其在GalK基因的-10区域中携带突变，所述突变导致野生型-10区域(TACGAT，SEQ ID NO：1)中的C被独立选自由A和T组成的组的核苷酸替换。

18.根据前述权利要求所述的乳酸细菌，其中所述突变导致C被T替换。

19.一种乳酸细菌，其包含SEQ ID NO：5或其启动子区域，该启动子区域包含-35区域和-10区域。

20.根据任一前述权利要求所述的乳酸细菌，其属于嗜热链球菌种。