[发明专利]用于抗原提取过程的方法和装置有效
申请号: | 201080038562.5 | 申请日: | 2010-08-23 |
公开(公告)号: | CN102597740A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | M·J·格尔德斯;C·J·塞文斯基;A·苏德 | 申请(专利权)人: | 通用电气公司 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N33/543 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李进;林森 |
地址: | 美国*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 抗原 提取 过程 方法 装置 | ||
1.一种甲醛固定的组织样品的抗原提取的方法,所述方法包含以下步骤:
在大于90℃的温度在第一抗原提取溶液中培养甲醛固定的组织样品;
将甲醛固定的组织样品转移到第二抗原提取溶液;并且
在大于90℃的温度在第二抗原提取溶液中培养甲醛固定的组织样品。
2.权利要求1的方法,其中:
第一抗原提取溶液包含具有约5和约7之间pH范围的缓冲溶液,第二抗原提取溶液包含具有约7.5和约11之间pH范围的缓冲溶液;或者
第一抗原提取溶液包含具有约7.5和约11之间pH范围的缓冲溶液,第二抗原提取溶液包含具有约5和约7之间pH范围的缓冲溶液。
3.权利要求2的方法,其中具有约5和约7之间pH范围的缓冲溶液包含柠檬酸、磷酸二氢钾、硼酸、二乙基巴比妥酸、哌嗪-N,N′-双(2-乙磺酸)、二甲基次胂酸、2-(N-吗啉代)乙磺酸或其组合。
4.权利要求3的方法,其中具有约5和约7之间pH范围的缓冲溶液包含柠檬酸。
5.权利要求2的方法,其中具有约7.5和约11之间pH范围的缓冲溶液包含三(羟基甲基)甲基胺(TRIS)、2-(N-吗啉代)乙磺酸(TAPS)、N,N-双(2-羟基乙基)甘氨酸(Bicine)、N-三(羟基甲基)甲基甘氨酸(Tricine)、4-2-羟基乙基-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)、2-{[三(羟基甲基)甲基]氨基}乙磺酸(TES)或其组合。
6.权利要求5的方法,其中具有约7.5和约11之间pH范围的缓冲溶液包含TRIS。
7.前述权利要求中一项或多项的方法,其中甲醛固定的组织样品嵌入石蜡中。
8.前述权利要求中一项或多项的方法,其中甲醛固定的组织样品为器官或组织、体液、组织或微阵列的切片部分。
9.前述权利要求中一项或多项的方法,其中利用第一抗原提取溶液和第二抗原提取溶液的培养步骤包含在加热装置中培养大于10分钟的时间。
10.权利要求9的方法,其中加热装置为高压锅、高压灭菌器、水浴、热板、微波、蒸汽加热或其组合。
11.前述权利要求中一项或多项的方法,所述方法进一步包含抗原免疫染色的步骤。
12.权利要求11的方法,其中免疫染色包含连续免疫过氧化物酶标记和清除。
13.前述权利要求中一项或多项的方法,其中甲醛固定的组织样品经历FISH或CISH分析。
14.一种用于提取甲醛固定的组织样品中的抗原的试剂盒,所述试剂盒包含:
提取样品中至少一部分未提取抗原的第一抗原提取溶液;和
提取样品中至少一些另一部分未提取抗原的第二抗原提取溶液。
15.权利要求14的试剂盒,其中第一抗原提取溶液为具有约5和约7之间pH范围的缓冲溶液,第二抗原提取溶液为具有约7.5和约11之间pH范围的缓冲溶液。
16.权利要求14或15的试剂盒,其中第一抗原提取溶液包含柠檬酸、磷酸二氢钾、硼酸、二乙基巴比妥酸、哌嗪-N,N′-双(2-乙磺酸)、二甲基次胂酸、2-(N-吗啉代)乙磺酸或其组合。
17.权利要求15或16的试剂盒,其中第一抗原提取溶液包含柠檬酸。
18.权利要求14至17中一项或多项的试剂盒,其中第二抗原提取溶液包含三(羟基甲基)甲基胺(TRIS)、2-(N-吗啉代)乙磺酸(TAPS)、N,N-双(2-羟基乙基)甘氨酸(Bicine)、N-三(羟基甲基)甲基甘氨酸(Tricine)、4-2-羟基乙基-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)、2-{[三(羟基甲基)甲基]氨基}乙磺酸(TES)或其组合。
19.权利要求18的试剂盒,其中第二抗原提取溶液包含TRIS。
20.权利要求14至19中一项或多项的试剂盒,所述试剂盒进一步包含一种或多种免疫染色剂。
21.一种用于进行权利要求11的方法的样品处理装置,所述样品处理装置包含样品处理子系统和试剂分配子系统。
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