[发明专利]双马来酸酐交联剂在固定细胞样品或组织样品中的用途有效
| 申请号: | 201080036711.4 | 申请日: | 2010-08-19 |
| 公开(公告)号: | CN102472696A | 公开(公告)日: | 2012-05-23 |
| 发明(设计)人: | H-P.乔赛尔;M.杰格;R.赫尔曼;R.I.西兹迪亚兹 | 申请(专利权)人: | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 |
| 主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 陈桉 |
| 地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 马来 酸酐 交联剂 固定 细胞 样品 组织 中的 用途 | ||
1.用于体外固定细胞样品或组织样品的方法,其中所述细胞样品或所述组织样品与式I的双马来酸酐孵育,
其中R1和R2独立地选自:氢、甲基、乙基、丙基、异丙基和丁基,
其中X为长度在1个和30个原子之间的连接基,
由此将所述细胞样品或所述组织样品固定。
2.权利要求1的方法,其中在所述双马来酸酐中,R1为氢或甲基且R2为氢或甲基。
3.权利要求1或2的方法,其中在所述双马来酸酐中,R1和R2是相同的。
4.权利要求1、2或3的方法,其中在所述双马来酸酐中,连接基X的长度为1-20个原子。
5.权利要求1-4中任一项所述的双马来酸酐,其中连接基X的主链由碳原子和任选的一个或多个选自O、N和S的杂原子组成。
6.权利要求1-5中任一项所述的方法,其中所述样品与双马来酸酐孵育1-72个小时。
7.权利要求1-6中任一项所述的方法,其中所述方法进一步包括将固定的样品包埋于石蜡中的步骤。
8.权利要求1-6中任一项所述的方法,所述方法进一步包括如下步骤
a)将固定的样品包埋于石蜡中,
b)将所述样品脱去石蜡,
c)除去双马来酰胺交联,和
e)对感兴趣的表位进行免疫检测。
9.权利要求8的方法,其中所述感兴趣的表位为当包括所述表位的所述细胞样品或组织样品用甲醛固定剂固定时被掩蔽或破坏的表位。
10.权利要求1-6中任一项所述的方法,所述方法进一步包括如下步骤
a)将步骤(a)的固定的样品包埋于石蜡中,
b)将所述样品脱去石蜡,
c)除去双马来酰胺交联,和
d)通过进行原位杂交来检测感兴趣的核酸。
11.权利要求1-6中任一项所述的方法,所述方法进一步包括如下步骤
a)将固定的样品包埋于石蜡中,
b)将所述样品脱去石蜡,
c)除去双马来酰胺交联,和
d)通过进行RT-PCR来检测感兴趣的核酸。
12.权利要求1-6中任一项所述的方法,所述方法进一步包括如下步骤
a)将固定的样品包埋于石蜡中,
b)将所述样品脱去石蜡,
c)除去双马来酰胺交联,和
d)通过进行RT-PCR或荧光原位杂交来免疫检测至少一种感兴趣的多肽以及检测至少一种感兴趣的核酸。
13.权利要求1-6中任一项所述的方法,所述方法进一步包括如下步骤
a)将固定的样品包埋于石蜡中,
b)将所述样品脱去石蜡,
c)除去双马来酰胺的交联,
d)分离核酸,和
e)用步骤(d)中分离的核酸进行突变分析。
14.双马来酸酐交联剂在固定细胞样品或组织样品中的用途。
15.双马来酸酐交联剂在制备用于固定细胞样品或组织样品的固定剂中的用途。
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