[发明专利]用于多能性基质细胞的神经元分化的方法、系统和组合物

说明书

技术领域

本发明的一些实施方式涉及用于治疗哺乳动物神经系统损伤和疾病的细胞类型的诱导和应用，但不限于此。

背景技术

某些神经系统损伤、影响中枢或周围神经系统的自身免疫性疾病、以及神经退行性疾病的特征在于特定细胞的损失、或存在神经细胞的功能异常，这些会引起患者出现不同的神经病学体征和症状以及可能不可逆转的神经功能丧失。仅作为一个实例，一些患有中风、脊椎损伤或其它神经损伤和变性的患者经受功能细胞类型的损失，或如帕金森氏症和阿尔茨海默氏症这样的反过来导致系统功能的丧失或异常的神经病症。目前，用于治疗和修复这样的细胞和系统功能的治疗选择是有限的。因此，仍然需要方法、系统和组合物来促进其它治疗，包括致力于替换缺失或受损的神经系统细胞、组织和功能的疗法。

发明内容

本发明的一些实施方式包括通过微小RNA(microRNA)的应用而在体外或体内选择性地诱导多能性基质细胞的神经元分化的方法、系统和组合物，包括但不限于miRNA-124、miRNA-137和/或miRNA-9*，这些miRNA的表达产物，和含有这些miRNA的功能元件(functional elements)的分子和组合物，但本发明并不局限于本文所描述的那些实施方式，且不存在具体放弃。本发明的一些实施方式也包含这样的诱导细胞的治疗给予和应用以治疗哺乳动物损伤和疾病，包括但不限于，可能在其它方面导致细胞或系统功能降低的神经系统损伤或疾病。

附图说明

现在将参照附图仅通过举例方式描述本发明的一些实施方式，对其它实施方式不存在具体的放弃，在附图中：

图1显示用生长因子处理或用对照miRNA和miRAN-124或miRNA-137转染3、5和9天的MSC的亮场图像(明场像，bright fieldimage)。

图2是显示miRAN-124、miRNA-137和miRNA-9*在MSC中诱导神经元标记的数据表示。

图3显示用测试的miRNA转染细胞或由DMEM处理后的蛋白质印迹结果。

图4显示用对照miRNA、miRAN-124或miRNA-137转染(动物)脂肪和脐带来源的MSC(cord derived MSC)的结果。

具体实施方式

本发明的一些实施方式包括通过微小RNA(microRNA)(“miRNA”或“miR”)的应用而在体外或体内选择性诱导多能性基质细胞(“MSC”)的神经元分化的方法、系统和组合物，包括但不限于，miRNA-124和/或miRNA-137、和/或miRNA-9*，这些miRNA的表达产物，以及含有这些miRNA的功能元件的分子和组合物，但本发明并不局限于本文所描述的那些实施方式，且对任何实施方式不存在具体放弃。本发明的一些实施方式也包含这样的经诱导的细胞用于治疗治疗哺乳动物损伤和疾病的治疗给药和用途，包括但不限于，可能在其它方面导致细胞或系统功能降低的神经系统损伤或疾病。在一些实施方式中，分化的MSC的这种诱导，和/或所产生的细胞，可以通过给予所述患者治疗有效量的感兴趣的miRNA、或由这样的miRNA诱导的分化MSC，而用于治疗患者体内的细胞、组织或器官损伤。

我们已经出乎意料地发现某些miRNA能够诱导受试者中MSC的长期神经元分化用于基于细胞疗法的用途，这些受试者呈现神经系统损伤和疾病，包括但不限于，神经退行性紊乱和脊髓损伤。这样的受试者可以包括哺乳动物，包括但不限于人。因此，我们已经发现这样的miRNA以及所产生的经诱导的MSC的新应用，除了其它可能的用途，它们能够减少或减轻哺乳动物中某些神经系统损伤或疾病的影响。

本发明的一些实施方式包括通过miRNA-124、miRNA-137、和/或miRNA-9*的应用和表达而诱导MSC的神经元分化的方法、系统、和/或组合物，但不限于此。MSC是典型地以非常低的浓度(10000个有核细胞中约1个)典型地存在于成年骨髓中的中胚层来源的细胞(mesoderm-derived cells)。MSC能够分化产生细胞，如骨髓基质、血管、脂肪、骨骼和软骨。这些细胞可能也具有分化为神经元/或神经胶质-样细胞的潜能，这取决于环境信号。此外，这些细胞可能被进一步诱导表达或通过与生长因子和激素的不同组合进行培养而保持特定神经元或神经胶质表型。