[发明专利]蛋白酶变体

权利要求书

1.一种多肽，其包含如SEQ ID NO：2所示的野生型人中性溶酶胞外结构域的蛋白酶变体，所述多肽对中性溶酶底物的特异性与野生型人中性溶酶相比提高至少10倍。

2.根据权利要求1所述的包含蛋白酶变体的多肽，所述多肽对β淀粉样肽的特异性与野生型人中性溶酶(SEQ ID NO：1)相比提高至少10倍。

3.一种多肽，其包含野生型人中性溶酶胞外催化结构域(SEQ ID NO：2)的蛋白酶变体，所述多肽与野生型人中性溶酶相比对Aβ肽的特异性更高，其中以下位置的氨基酸中的一个或多个被另一种天然存在的氨基酸替换：T99、S100、S101、G104、D107、G195、T206、H211、H214、H217、D219、Q220、G224、S227、R228、D229、F247、A287、R292、L323、Y346、M376、D377、L378、S380、S381、F393、R394、A396、G399、E403、T404、A405、Y413、N415、G416、N417、E419、V422、A468、1485、1510、L514、F516、S517、Q518、Q521、L522、K524、E533、W534、S536、G537、V540、Y545、S546、S547、G548、D590、D591、N592、G593、F596、G600、W606、Q624、A649、V692、W693、Y697、Y701、N704、S705、T708、D709、V710、S712、G714、R735和K745。

4.一种多肽，其包含人中性溶酶胞外催化结构域(SEQ ID NO：2)的蛋白酶变体，所述多肽与野生型人中性溶酶相比对Aβ肽的特异性更高，其中已在一个或多个位置处进行如下氨基酸更换：

T99被D替换，

S100被I替换，

S101被L、V、Y或I替换，

G104被L、M、R、V或W替换，

D107被N、V或W替换，

G195被V替换，

T206被R替换，

H211被N替换，

H214被N替换，

H217被N替换，

D219被A替换，

Q220被K替换，

G224被W替换，

S227被L或R替换，

R228被G替换，

D229被N替换，

F247被C或L替换，

A287被S替换，

R292被M替换，

L323被F替换，

Y346被W替换，

M376被Y替换，

D377被F、H、T、Y或G替换，

L378被E、K或R替换，

S380被K或R替换，

S381被R替换，

F393被S替换，

R394被C、E、G、M或P替换，

A396被D替换，

G399被V替换，

E403被H、L或S替换，

T404被D或F替换，

A405被T替换，

Y413被D替换，

N415被A替换，

G416被R或W替换，

N417被W替换，

E419被L、M、F或K替换，

V422被M替换，

A468被S替换，

I485被V替换，

I510被D、E、F或R替换，

L514被K或F替换，

F516被R替换，

S517被D、F、R、W或Y替换，

Q518被R或P替换，

Q521被R或E替换，

L522被Y替换，

K524被R替换，

E533被F、A或R替换，

W534被C替换，

S536被G、P、R、E、E或W替换，

G537被E或T替换，

V540被C、E、F或G替换，

Y545被S或V替换，

S546被D、E、I、R、W或Y替换，

S547被D、E、F、G或K替换，

G548被C、E、R或W替换，

D590被F、M或W替换，

D591被E或L替换，

N592被P替换，

G593被V或D替换，

F596被P替换，

G600被D、V或W替换，

W606被S替换，

Q624被H替换，

A649被G替换，

V692被M替换，

W693被C、F、N、Q、V或L替换，

Y697被G替换，

Y701被G或R替换，

N704被E、G、R或W替换，

S705被R替换，

T708被K替换，

D709被K或V替换，

V710被F替换，

S712被H、L、Q或G替换，

G714被H或K替换，

R735被H替换，以及

K745被N替换。