[发明专利]用于移植的同种异体皮肤的处理方法及由其制备的冷冻保存同种异体皮肤

说明书

技术领域

本发明涉及用于移植的同种异体皮肤的处理方法及由其制备的冷冻保存同种异体皮肤。更详细地，涉及以二甲基亚砜(dimethyl s ulfoxide)、动物细胞培养基及胎牛血清(fetal bovine serum)为基本成分，在其中添加蔗糖(sucrose)，从而制得冷冻保护剂，然后利用该溶液冷冻处理用于移植的皮肤组织的方法。

背景技术

皮肤是覆盖整个人体表面的最大器官，其防止体液的流失，以及防止有害物质和微生物由外部进入，抵御来自物理、化学方面的刺激等，执行保护我们身体的功能。对于因严重的烧伤、外伤、上皮癌切除及皮肤疾病等而使皮肤严重受损的患者，应起到阻止受损部位感染及体液损失的保护膜的作用，同时应使患者的伤口部位不留下疤痕，防止在自然愈合过程中可能发生的严重收缩。用于使受损的皮肤组织再生的方法有以下三种：移植患者自身皮肤的自体移植(autograft)、移植他人皮肤的同种异体移植(allograft)及移植动物皮肤的异种移植(xenograft)。这些方法中自体移植最为理想，但烧伤部位范围大的情况下，能够确保组织的部位有限，在取皮部位还会留下新的伤口，因此存在困难。同种异体移植与其说起到永久移植的作用，不如说起到有助于伤口周围区域的细胞移动和愈合的作用。

特别是在表皮层、真皮层及直至皮下层受损的3度烧伤的情况下，必须要进行皮肤移植治疗。现在主要采用的皮肤移植治疗方法为自体移植方法，由于在摘除了皮肤的健康部位产生新的外伤，因此增加了患者的痛苦，需要很长时间痊愈，并且经济负担也大。此外，如严重的烧伤患者没有足够的身体健康部位的情况下，存在无法采用自体移植方法或需要进行多次移植手术的问题。试图通过采用他人皮肤的同种异体移植或采用猪等其它动物皮肤的异种移植等来解决上述问题，但这样不仅会发生免疫排斥反应，还会带来其它多种副作用。

并且，国内外医院实施的烧伤手术最普遍的情况为：先将坏死的表皮层和真皮层去除，然后利用捐赠者尸体的皮肤，去除表皮后，利用去除了真皮内细胞的无细胞真皮进行皮肤移植，以消除免疫排斥反应。之后培养的角质细胞在其上完成完整的皮肤。这样完成的皮肤含有基膜层，因此能够像实际皮肤一样起到保护我们身体的作用，防止外界有害物质的进入。但是这种用于移植的皮肤价格非常昂贵，并且大部分为进口产品，存在供需不畅的问题。

另外，目前广泛采用的用于处理从捐赠者身上摘取的皮肤的方法为对皮肤用不同浓度的甘油进行处理的甘油保存法，但该方法使细胞失去生命力而使得细胞存活率低，导致治疗时间长。

发明内容

本发明要解决的技术问题

因此，本发明的目的在于提供一种新的用于移植的同种异体皮肤的处理方法，并以此作为技术课题，该方法在对用于移植的皮肤进行加工时，与现有的甘油保存法相比，能够更加有效地提高细胞的存活率，使生物学性质的变化最小化。

解决技术问题的技术手段

为了实现上述目的，本发明提供用于移植的同种异体皮肤的处理方法，其包括下列步骤：i)混合胎牛血清(fetal bovine serum)、动物细胞培养基及二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide)；

ii)在上述溶液中溶解蔗糖(sucrose)，从而制得冷冻保护剂；

iii)将上述冷冻保护剂浸透于分离的皮肤中；

iv)将浸透了冷冻保护剂的皮肤在程序冷冻仪(controlled rate f reezer)中冷冻。

本发明还提供由上述处理方法制得的冷冻保存同种异体皮肤。

下面详细说明本发明。