[发明专利]抗癌剂、癌细胞的凋亡诱导方法及抗癌剂的筛选方法

说明书

技术领域

本发明涉及可以通过特异性抑制作为核内蛋白质的RBM8A或Magoh的表达来诱导癌细胞的细胞死亡的抗癌剂、使用了该抗癌剂的癌细胞的凋亡诱导方法、含有该抗癌剂作为有效成分的药物组合物及通过测定RBM8A或Magoh的表达量的抗癌剂的筛选方法。

背景技术

在癌的诊断及治疗领域，目前为止，利用各种蛋白质组学分析，鉴定了在癌细胞中特异性表达的蛋白质。一直以来，在以所述蛋白质作为靶的癌治疗的研究中，焦点集中在利用该蛋白质的表达及/或活性的增强或抑制进行控制。

序列号1表示的核内蛋白质即人RBM8A(RNA binding motif protein 8A)为分子量比较低的蛋白质，与被报道了与各种因子的相互作用的黑腹果蝇的Y14具有同源性。此处，关于Y14，报道了其具有RNA结合基序，与作为其它核内蛋白质的Magoh形成异源二聚体，与RNA结合，通过在黑腹果蝇的培养细胞中抑制其表达，能够抑制细胞增殖。但是，关于在其他物种中与Y14具有同源性的蛋白质，其功能不明确，特别是也没有针对与DNA复制和细胞分裂相关功能的关联性的任何报道等，也没有明确是否在细胞周期的任一阶段抑制细胞的增殖(参见非专利文献1)。特别是，仅通过引起细胞的增殖抑制不能作为抗癌剂使用，只有诱导凋亡等细胞死亡才能够用作抗癌剂，所以也不明确抑制Y14在其它生物中的相同蛋白质的因子能否用于含有抗癌剂等的药物组合物。

另一方面，已知序列号5表示的蛋白质即人Magoh与人RBM8A形成异源二聚体，与RNA结合。但是，尚不清楚抑制所述Magoh的因子是否能用于含有抗癌剂等的药物组合物中。

目前，RNA干扰(RNA interference：RNAi)技术被频繁地用于生命科学领域的研究中，已经广泛认识了其有用性。此处，所谓RNAi，是指通过双链RNA其序列特异性地分解mRNA，结果抑制基因的表达的现象。自2001年报道了作为21个碱基的低分子双链RNA的siRNA(small interference RNA)能够在哺乳动物的细胞内介导RNAi以来，siRNA被频繁用作靶基因的表达抑制方法，并且近年来也报道了用于在RNAi中获得更高效果的、siRNA的序列选择基准(参见非专利文献2及3)。

也期待RNAi技术应用于药品和包括癌的各种难治性疾病的治疗。例如，专利文献1中公开了间质性肺疾病治疗剂，其特征在于，含有siRNA等抑制特定的蛋白质的表达的物质作为有效成分。

一直以来，已知很多抗癌剂显示出在细胞周期的S期特异性抑制细胞周期的发展的活性，与此相对，紫杉醇等紫杉烷类抗癌剂通过与微管结合，抑制微管的解聚，由此抑制M期的细胞周期的发展。如上所述，期待抑制M期的细胞周期的发展的抗癌剂能够广泛用于癌治疗。

专利文献1：日本特开2007-319009号公报

非专利文献1：Herve Le Hir et al.，“The protein Mago provides a link between splicing and mRNA”，EMBO reports，12，p.1119-1124(2001)

非专利文献2：Elbashir S.M.et al.，“Duplexes of 21-nucleotide RNAs mediate RNA interference in cultured mammalian cells”，Nature，411(6836)，p.494-498(2001)

非专利文献3：Reynolds A.et al.，“Rational siRNA design for RNA interference”，Nature Biotechnol.，22(3)，p.326-330(2004)

发明内容

但是，担心紫杉醇等紫杉烷类抗癌剂显示白细胞和嗜中性粒细胞的减少、对末梢神经的损伤、恶心和呕吐等副作用，寻求开发出与紫杉烷类抗癌剂不同、抑制M期的细胞周期的发展的抗癌剂。

本发明人等鉴于上述课题进行了深入研究。结果发现人的Y14的相同蛋白质即RBM8A局部存在于中心体、纺锤丝、收缩管，通过抑制RBM8A的表达来抑制微管蛋白的正常聚合，使癌细胞在M期集聚；通过抑制RBM8A的表达，在M期集聚的细胞中引起凋亡。另外，还发现通过抑制Magoh的表达也抑制了RBM8A的表达，引起凋亡。基于上述发现，本发明人等发现抑制RBM8A或Magoh的表达的物质能够用作抗癌剂，完成了本发明。

具体而言，本发明提供了以下方案。