[发明专利]用于卵母细胞的收集及成熟的方法

权利要求书

1.一种以辅助生殖技术自卵母细胞生产胚胎的方法，该方法包括：

a)在包括第一个磷酸二酯酶抑制剂和增加卵母细胞细胞内cAMP浓度试剂的收集培养基中自受试者卵巢收集卵母细胞；

b)在包括第二个磷酸二酯酶抑制剂的成熟培养基中培养卵母细胞；及

c)以辅助生殖技术自卵母细胞生产胚胎。

2.根据权利要求1所述的方法，其中该试剂增加了卵母细胞细胞内cAMP生产。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中该试剂是毛喉素。

4.根据权利要求1所述的方法，其中该试剂降低了卵母细胞细胞内cAMP降解。

5.根据权利要求1至4任一项所述的方法，其中该方法还包括暴露卵母细胞于诱导卵母细胞成熟的配体。

6.根据权利要求5所述的方法，其中配体浓度克服了cAMP诱导的卵母细胞减数分裂阻滞。

7.根据权利要求5或权利要求6所述的方法，其中该配体是卵泡刺激素(FSH)。

8.根据权利要求7所述的方法，其中FSH浓度大于10mIU/ml。

9.根据权利要求5至8任一项所述的方法，其中该配体是表皮生长因子(EGF)。

10.根据权利要求9所述的方法，其中EGF浓度大于1ng/ml。

11.根据权利要求1至10任一项所述的方法，其中第一个磷酸二酯酶抑制剂和第二个磷酸二酯酶抑制剂不同。

12.根据权利要求1至11任一项所述的方法，其中第一个磷酸二酯酶抑制剂是IBMX。

13.根据权利要求1至12任一项所述的方法，其中第二个磷酸二酯酶抑制剂是环己喹酰胺。

14.根据权利要求1至10任一项所述的方法，其中第一个磷酸二酯酶抑制剂和第二个磷酸二酯酶抑制剂相同。

15.根据权利要求1至14任一项所述的方法，其中辅助生殖技术包括体外受精。

16.根据权利要求1至15任一项所述的方法，其中胚胎是人类胚胎。

17.根据权利要求16所述的方法，其中体外受精发生在卵母细胞收集后大于24小时。

18.根据权利要求1至15任一项所述的方法，其中胚胎是牛胚胎。

19.一种体外成熟卵母细胞的方法，该方法包括：

a)在包括第一个磷酸二酯酶抑制剂和增加卵母细胞细胞内cAMP浓度试剂的收集培养基中自受试者卵巢收集卵母细胞；

b)在包括第二个磷酸二酯酶抑制剂的成熟培养基中培养卵母细胞。

20.根据权利要求19所述的方法，其中该试剂增加了卵母细胞细胞内cAMP生产。

21.根据权利要求19或权利要求20所述的方法，其中该试剂是毛喉素。

22.根据权利要求19所述的方法，其中该试剂降低了卵母细胞细胞内cAMP降解。

23.根据权利要求19至22的任一项所述的方法，其中该方法还包括暴露卵母细胞于诱导卵母细胞成熟的配体。

24.根据权利要求23所述的方法，其中配体浓度克服了cAMP诱导的卵母细胞减数分裂阻滞。

25.根据权利要求23或权利要求24所述的方法，其中该配体是卵泡刺激素(FSH)。

26.根据权利要求25所述的方法，其中FSH浓度大于10mIU/ml。

27.根据权利要求23或权利要求24所述的方法，其中该配体是表皮生长因子(EGF)。

28.根据权利要求27所述的方法，其中EGF浓度大于1ng/ml。

29.根据权利要求19至28任一项所述的方法，其中第一个磷酸二酯酶抑制剂和第二个磷酸二酯酶抑制剂不同。