[发明专利]微阵列中的探针定位方法有效
| 申请号: | 201080027625.7 | 申请日: | 2010-06-10 |
| 公开(公告)号: | CN102459641B | 公开(公告)日: | 2012-05-16 |
| 发明(设计)人: | 平山幸一;山野博文;丹花通文 | 申请(专利权)人: | 东洋钢钣株式会社 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12M1/00;G01N21/64;G01N21/78;G01N33/53;G01N33/543;G01N37/00;C12N15/09 |
| 代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 孔青;郭文洁 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 阵列 中的 探针 定位 方法 | ||
1.使用微阵列检测探针多核苷酸与靶多核苷酸的杂交的方法,该方法包括以下步骤:
1) 使荧光标记的靶多核苷酸和与基准多核苷酸杂交的荧光标记的标记多核苷酸与微阵列接触的步骤,所述微阵列除了具有多个固定有探针多核苷酸的检测用点以外,还具有一处以上的固定有基准多核苷酸的基准点;
2) 通过清洗微阵列除去未反应的靶多核苷酸的步骤;
3) 测定基准点的荧光,当满足规定的值时,判断为可以测定的步骤;以及
4) 若判断为可以测定,则测定固定有探针多核苷酸的各检测用点的荧光的步骤,
并且,下述步骤可以在基准点的荧光测定之前实施,也可以在其后实施,
对于多个的检测用点和基准点,分别测定距点中心一定距离的位置的亮度,得到多个本底值的步骤;算出代表所得的多个本底值的本底代表值的步骤;以及对于所有的点或测定了本底值的所有的点,分别算出本底值与本底代表值之差,当存在具有规定的值以上的差的点时,判断为无法测定的步骤。
2.使用微阵列检测探针多核苷酸与靶多核苷酸的杂交的方法,该方法包括以下步骤:
1) 使荧光标记的靶多核苷酸和与基准多核苷酸杂交的荧光标记的标记多核苷酸与微阵列接触的步骤,所述微阵列除了具有多个固定有探针多核苷酸的检测用点以外,还具有一处以上的固定有基准多核苷酸的基准点;
2) 通过清洗微阵列除去未反应的靶多核苷酸的步骤;
3) 测定基准点的荧光,当满足规定的值时,判断为可以测定的步骤;以及
4) 若判断为可以测定,则测定固定有探针多核苷酸的各检测用点的荧光的步骤,
并且,下述步骤可以在基准点的荧光测定之前实施,也可以在其后实施,
对于多个的检测用点和基准点,分别测定距点中心一定距离的位置的亮度,得到多个本底值的步骤;算出多个本底值的平均值或中间值作为本底代表值的步骤;以及当本底代表值为规定值以上时,判断为无法测定的步骤。
3.权利要求1或2所述的方法,其中,标记多核苷酸的荧光标记与靶多核苷酸的荧光标记相同。
4.权利要求1或2所述的方法,其中,在微阵列中,检测用点和基准点被排列配置,存在至少两处基准点,以连接任意两处基准点的线为基准线,根据距基准点的距离和偏离基准线的角度测定检测用点的位置。
5.权利要求4所述的方法,其中,检测用点和基准点被配置成外周为四角形的格子状,基准点存在于四角形的不同的顶点处。
6.权利要求1或2所述的方法,其中,标记多核苷酸和与基准多核苷酸互补的多核苷酸具有95%以上的同源性。
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