[发明专利]通过酰基-辅酶A溶血磷脂酰基转移酶的表达对长链ω-3和ω-6多不饱和脂肪酸的生物合成的改善

权利要求书

1.用于至少一种长链多不饱和脂肪酸的改善生产的含油重组微生物宿主细胞，所述宿主细胞包含至少一种分离的多核苷酸，所述多核苷酸编码具有至少酰基-辅酶A：溶血磷脂酰基转移酶活性的多肽，其中所述多肽选自：

a)基于Clustal W比对方法，在与选自SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：11的氨基酸序列进行比较时，具有至少45％的氨基酸同一性的多肽；

b)具有至少一种膜结合O-酰基转移酶蛋白质家族基序的多肽，其中所述膜结合O-酰基转移酶蛋白质家族基序选自：SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：28；

c)基于Clustal W比对方法，在与如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列进行比较时，具有至少90％的氨基酸同一性的多肽；

d)基于Clustal W比对方法，在与选自SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：18的氨基酸序列进行比较时，具有至少43.9％的氨基酸同一性的多肽；和

e)具有至少一种1-酰基-sn-甘油-3-磷酸酰基转移酶家族基序的多肽，其中所述1-酰基-sn-甘油-3-磷酸酰基转移酶家族基序选自：SEQ ID NO：19和SEQ ID NO：20；

其中所述编码具有至少酰基-辅酶A：溶血磷脂酰基转移酶活性的多肽的至少一种分离的多核苷酸可操作地连接到至少一种调控序列，所述调控序列是相同的或不同的；并且，

其中所述宿主细胞还具有至少一种改善，所述改善选自：

(i)在与对照宿主细胞进行比较时，在生产至少一种长链多不饱和脂肪酸的含油微生物宿主细胞中C₁₈-C₂₀延伸转化效率的提高；

(ii)在与对照宿主细胞进行比较时，在生产至少一种长链多不饱和脂肪酸的含油微生物宿主细胞中Δ4去饱和转化效率的提高。

2.权利要求1的重组宿主细胞，其中所述至少一种长链多不饱和脂肪酸选自：二十碳二烯酸、二高-γ亚麻酸、花生四烯酸、二十碳三烯酸、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳四烯酸、ω-6二十二碳五烯酸、ω-3二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸。

3.权利要求1的重组宿主细胞，其中所述编码具有至少酰基-辅酶A：溶血磷脂酰基转移酶活性的多肽的多核苷酸被稳定地整合；并且，其中所述宿主细胞还具有至少一种改善，所述改善选自：

a)在与对照宿主细胞进行比较时，在生产至少一种长链多不饱和脂肪酸的含油微生物宿主细胞中C₁₈-C₂₀延伸转化效率至少4％的提高；和，

b)在与对照宿主细胞进行比较时，在生产至少一种长链多不饱和脂肪酸的含油微生物宿主细胞中Δ4去饱和转化效率至少5％的提高。

4.权利要求3的重组宿主细胞，其中所述改善选自：

a)在与对照宿主细胞进行比较时，在生产二十碳五烯酸的宿主细胞中C₁₈-C₂₀延伸转化效率至少13％的提高；

b)在与对照宿主细胞进行比较时，在生产二十二碳六烯酸的宿主细胞中C₁₈-C₂₀延伸转化效率至少4％的提高；

c)在与对照宿主细胞进行比较时，在生产二十二碳六烯酸的宿主细胞中Δ4去饱和转化效率至少18％的提高；

d)在与对照宿主细胞进行比较时，在生产二十碳五烯酸的宿主细胞中，以总脂肪酸的重量百分比测量的至少9％重量的二十碳五烯酸的提高；

e)在与对照宿主细胞进行比较时，在生产二十二碳六烯酸的宿主细胞中，以总脂肪酸的重量百分比测量的至少2％重量的二十碳五烯酸的提高；和

f)在与对照宿主细胞进行比较时，在生产二十二碳六烯酸的宿主细胞中，以总脂肪酸的重量百分比测量的至少9％重量的二十二碳六烯酸的提高。

5.权利要求1-4中任一项的重组宿主细胞，其中所述微生物为酵母。

6.权利要求5的重组宿主细胞，其中所述酵母为解脂耶氏酵母。

7.包含二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸的油，所述油从权利要求4的含油重组微生物宿主细胞获得。