[发明专利]来自环状芽孢杆菌的β-半乳糖苷酶

权利要求书

1.一种来自环状芽孢杆菌的β-半乳糖苷酶，其利用SDS-PAGE测得的分子量为195kDa。

2.一种来自环状芽孢杆菌的β-半乳糖苷酶，其由权利要求1所述的β-半乳糖苷酶的片段构成。

3.一种β-半乳糖苷酶，由序列号7的氨基酸序列、或显示β-半乳糖苷酶活性的其片段构成。

4.根据权利要求3所述的β-半乳糖苷酶，其中，所述片段含有序列号7的氨基酸序列中从N末端到WSIGNEIY即序列号18的区域。

5.根据权利要求3所述的β-半乳糖苷酶，其中，所述片段含有序列号8～10的任一序列号的氨基酸序列。

6.根据权利要求3所述的β-半乳糖苷酶，其中，由含有序列号5的序列的DNA进行编码。

7.一种β-半乳糖苷酶基因，其由选自以下(a)～(e)中的任一DNA构成：

(a)编码序列号6或7的氨基酸序列的DNA；

(b)含有序列号5的序列的DNA；

(c)在严格条件下对与序列号5的序列互补的序列进行杂交的DNA；

(d)作为序列号5的序列的DNA序列简并体的DNA；

(e)由以序列号5的序列为基准并含有1个或多个碱基的取代、缺失、插入、附加或逆位的序列构成的且编码具有β-半乳糖苷酶活性的蛋白质的DNA。

8.根据权利要求7所述的β-半乳糖苷酶基因，其中，具有β-半乳糖苷酶活性的蛋白质由序列号7的氨基酸序列中发生小于60％、优选为小于45％、进一步优选为小于25％的变化的序列或其片段构成。

9.根据权利要求8所述的β-半乳糖苷酶基因，其中，所述变化为保守性氨基酸取代。

10.一种β-半乳糖苷酶，由权利要求7～9中任一项所述的β-半乳糖苷酶基因编码。

11.一种重组载体，其含有权利要求7～9中任一项所述的β-半乳糖苷酶基因。

12.根据权利要求11所述的重组载体，其为表达载体。

13.一种转化体，其导入有权利要求7～9中任一项所述的β-半乳糖苷酶基因。

14.一种转化体，其导入有权利要求11或12所述的重组载体。

15.根据权利要求13或14所述的转化体，其为细菌细胞、酵母细胞或真菌细胞。

16.一种β-半乳糖苷酶的制造方法，其包括以下步骤(1)和(2)：

(1)将权利要求13～15中任一项所述的转化体在能产生由所述β-半乳糖苷酶基因编码的蛋白质的条件下进行培养的步骤；

(2)将产生的所述蛋白质进行回收的步骤。

17.一种酶剂，将权利要求1～6和10中任一项所述的β-半乳糖苷酶作为有效成分。

18.根据权利要求17所述的酶剂，其中，所述有效成分是选自含有序列号7的氨基酸序列的β-半乳糖苷酶、含有序列号8的氨基酸序列的β-半乳糖苷酶、含有序列号9的氨基酸序列的β-半乳糖苷酶和含有序列号10的氨基酸序列的β-半乳糖苷酶中的一种以上的β-半乳糖苷酶。

19.一种权利要求1～6和10中任一项所述的β-半乳糖苷酶或者权利要求17或18所述的酶剂的使用，用于制造选自低乳糖牛奶、作为肠内双歧杆菌生长因子的低聚半乳糖、乳糖不耐受症患者用药品或补充剂中的制品。

20.低乳糖牛奶、作为肠内双歧杆菌生长因子的低聚半乳糖、乳糖不耐受症患者用药品或补充剂，其使用权利要求1～6和10中任一项所述的β-半乳糖苷酶或者权利要求17或18所述的酶剂而得到。