[发明专利]鸟类性别判定的方法

说明书

发明领域

本发明涉及孵化前鸟类胚胎性别判定的方法和装置。更具体而言，本发明涉及用于蛋中测定鸟类物种性别并可将所述蛋分成基本上由雄性或雌性胚胎组成的组的非侵入性方法和装置。本发明使用非侵入性的蛋内测定方法进行性别鉴定。蛋内测定是指在蛋内进行测定，而不需要从蛋中取样。

相关技术描述

性别分离是所有鸟类物种生产的一个重要方面，但尤其是肉鸡和基本上所有的产蛋鸡和火鸡生产。对于肉鸡和火鸡，性别分离可以根据两种性别的需求提供更适合的管理和喂养，其在某种程度上不同于现在大多数情况下所做的单一性别饲养。通过使用群体性别分离，基本上所有商业上孵出的母鸡均可以成为产蛋母鸡。公鸡在孵蛋处被淘汰，而母鸡最终用于产蛋。

目前有三种方法可用于家禽性别鉴定。鸡苗可通过肛门/泄殖腔性别鉴定、或羽毛性别鉴定方法鉴定性别。或者，可以将雄性和雌性的雏鸡饲养在一起直到第二性征显现出来，然后可基于性别分离小鸡。肛门/泄殖腔性别鉴定依赖于性别的视觉鉴定，基于性别相关的解剖结构的外观。羽毛性别鉴定基于雄性和雌性小鸡的不同羽毛特点，例如翅膀羽毛的彩色图案和生长速度的快/慢。第三种方法依赖于自然的第二性征的外观，例如，雄性的鸡冠和肉垂比雌性的更大。

鸡苗的肛门/泄殖腔性别鉴定困难且昂贵。鉴别鸟类的性别需要非常熟练的人员。虽然更容易执行，但羽毛性别鉴定缺点在于仅限于特定的鸟类遗传杂交。第二性征的性别鉴定是最容易实施的方法，但缺点是要求两种性别的鸟类孵化后在一起饲养一周，鉴于饲料成本和饲料转化的考虑，其比肛门/泄殖腔性别鉴定的费用更加昂贵。

最重要的，因为肉类和蛋类制品的生产都不断优化，被淘汰的产蛋鸡的雄性小鸡不再适合于经济上有吸引力的肉类生产。因此，每年在美国和欧洲有超过5亿只雄性小鸡被毒气、电击或切碎杀死。这不仅仅是一个经济问题，也越来越成为一个道德问题。

显然，商业孵化产业需要一种方法，其能够在很早的阶段区分鸟类的性别，而不需要娴熟的技术人员或者使用特定的鸟类遗传杂交。最近已经开发了一些方法。

在US6512839中描述了通过超声肛门或泄殖腔扫描技术确定幼体性别。虽然其可以自动化并降低性别测定过程中的成本，但它依然具有缺点：这是孵化后的技术，因此蛋必需孵化，雄性小鸡需要处死。

US6029080中描述了蛋内测定鸟类物种性别的方法，包括对整个蛋进行NMR成像(非侵入性)以测定正在孵化的蛋的胚胎中雄性或雌性器官的存在。检测NMR信号并转化为性器官成像，其通过图像处理计算机分析，鉴定蛋中的胚胎性别。尽管是一项非侵入性技术，但其仍然具有若干缺点。该方法的一个具体的缺点是其仅可用于胚胎发育的晚期阶段，性器官发育到一定程度以便能够进行确认。除了浪费孵化能力以外，其缺点还在于雄性蛋不能被用于其他目的，而且破坏该发育阶段的胚胎依然可能产生伦理学问题。此外，该方法在经济上欠缺吸引力，因为首先所有的NMR检测装置，尤其是与成像设备配套的装置非常昂贵，而且该技术很复杂，因为鸡蛋最好是冷却的，以防止胚胎的运动。

US7167579描述了通过拍摄鸡蛋的图像确定鸡蛋性别，其从图像中产生二维轮廓影像数据，从轮廓影像数据中提取参数，使用所提取的参数确定鸡蛋的性别。该方法被认为不够可靠。

WO2004/016812中鸟类个体的蛋性别通过从蛋中取样确定，优选取自尿囊液或羊水。通过与特定的核酸探针杂交确定某些DNA序列的存在。杂交样本的分析包括PCR扩增步骤。

尽管该方法是准确且充分可靠的，但也是高度精细、缓慢和昂贵的，因此在经济上没有吸引力，但是最重要的是它应用于发育后期，此时羊膜已经形成。该方法是侵入性的，表明必须从蛋中取样，其显著增加了成本和造成感染和畸变的风险。此外，该方法依赖于非常昂贵且费时的核酸扩增技术，例如PCR。这表明该性别鉴定方法不可能具有很高的生产率，对于商业孵化所是不具有经济吸引力的。

文献WO2004/016812也提到了使用对于由性别特异性DNA序列编码的肽(及其衍生物、片段和能结合所述多肽的合成构建体)的(单克隆)抗体。该方法包括用所述(优选带有可检测标记的)抗体接触从所述鸟类个体中提取的样本，并且是蛋外的。该文献同样提及包含共价连接部分的合成抗体构建体，其提供了除抗原结合外的其他一些需要的性质，例如标记(可检测的标记，例如荧光或放射性标记)或药物活性剂。实施例9描述了生产用于鉴定FAF肽的单克隆抗体的方法。

发明概述