[发明专利]来源于生物质聚合物的脂肪酸脂产物

权利要求书

1.一种由生物质聚合物制备脂肪酸乙酯的方法，包括：

a)提供宿主细胞，其中所述宿主细胞含有编码硫酯酶、脂酰-coA合成酶、酰基转移酶、醇脱氢酶、丙酮酸脱羧酶、和一种或多种生物质聚合物降解酶的一种或多种重组核酸，其中所述一种或多种生物质聚合物降解酶由所述宿主细胞分泌，

b)在培养基中培养所述宿主细胞以形成培养物，使得所述一种或多种重组核酸在所述细胞中表达，其中所述培养基含有生物质聚合物作为所述宿主细胞的碳源，和

c)从所述培养物中提取脂肪酸乙酯。

2.权利要求1所述的方法，其中所述宿主细胞含有编码脂酰-coA脱氢酶的内源性核酸。

3.权利要求2所述的方法，其中所述宿主细胞被修饰为使得所述脂酰-coA脱氢酶的表达相对于未修饰细胞的表达水平减弱。

4.权利要求1所述的方法，其中所述宿主细胞是细菌细胞。

5.权利要求4所述的方法，其中所述细菌细胞是大肠杆菌细胞。

6.权利要求1所述的方法，其中所述宿主细胞是真菌细胞。

7.权利要求6所述的方法，其中所述真菌细胞是酵母细胞。

8.权利要求1所述的方法，其中所述宿主细胞是植物细胞、动物细胞或者人体细胞。

9.权利要求1所述的方法，其中所述硫酯酶是来自大肠杆菌的ltesA。

10.权利要求1所述的方法，其中所述脂酰-coA合成酶是来自大肠杆菌的fadD。

11.权利要求1所述的方法，其中所述醇脱氢酶是来自运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)的adhB。

12.权利要求1所述的方法，其中所述丙酮酸脱羧酶是来自运动发酵单胞菌的pdc。

13.权利要求1所述的方法，其中所述酰基转移酶是来自不动细菌属(Acinetobacter)菌株ADP1的蜡酯合酶atfA。

14.权利要求1所述的方法，其中所述生物质聚合物是半纤维素。

15.权利要求14所述的方法，其中所述半纤维素是木聚糖。

16.权利要求15所述的方法，其中所述一种或多种生物质聚合物降解酶是木聚糖酶和含有木聚糖内切酶催化结构域的蛋白。

17.权利要求16所述的方法，其中所述木聚糖酶是来自卵形拟杆菌(Bacteroides ovatus)的xsa。

18.权利要求16所述的方法，其中所述木聚糖内切酶催化结构域是来源于来自粪堆梭菌(Clostridium stercorarium)的xyn10B。

19.权利要求1所述的方法，其中所述生物质聚合物是纤维素。

20.权利要求19所述的方法，其中所述一种或多种生物质聚合物降解酶是含有纤维二糖水解酶催化结构域的蛋白、β-葡萄糖苷酶和含有纤维素酶催化结构域的蛋白。

21.权利要求20所述的方法，其中所述纤维二糖水解酶催化结构域是来源于来自纤维弧菌(Cellvibrio japonicus)的cel6A，所述β-葡萄糖苷酶是来自纤维弧菌的cel3B，并且所述纤维素酶催化结构域是来源于来自芽孢杆菌(Bacillus sp.)D04的cel。

22.权利要求1所述的方法，其中所述培养基不含游离脂肪酸或者醇。

23.一种经基因修饰的宿主细胞，含有编码硫酯酶、脂酰-coA合成酶、酰基转移酶、醇脱氢酶、丙酮酸脱羧酶、和一种或多种生物质聚合物降解酶的一种或多种重组核酸，其中所述一种或多种生物质聚合物降解酶是分泌酶。

24.权利要求23所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞含有编码脂酰-coA脱氢酶的内源性核酸。

25.权利要求24的宿主细胞，其中所述宿主细胞被修饰为使得所述脂酰-coA脱氢酶的表达相对于未修饰细胞中的表达水平减弱。