[发明专利]通过发酵条件改变酶平衡

权利要求书

1.制备混合的糖类组合物的方法，所述方法包括：

a)将葡萄糖溶液与转糖基化酶混合，产生酶-葡萄糖混合物；

b)在升高的温度下孵育酶-葡萄糖混合物一定时间，所述时间足以产生包含至少一种寡糖的加工的葡萄糖混合物；

c)将加工的葡萄糖混合物与戊糖混合，产生混合的糖类组合物。

2.权利要求1的方法，其中葡萄糖溶液包含从约5％至约75％(wt/wt)的葡萄糖。

3.权利要求1的方法，其中转糖基化酶是β-葡糖苷酶。

4.权利要求3的方法，其中酶-葡萄糖混合物含有每千克从约0.01MUβ-葡糖苷酶活性至约0.1MU β-葡糖苷酶活性。

5.权利要求1的方法，其中转糖基化酶是内切葡聚糖酶。

6.权利要求1的方法，其中升高的温度是从约50℃至约75℃。

7.权利要求1的方法，其中孵育纤维素酶-葡萄糖混合物8小时至500小时。

8.权利要求1的方法，其中戊糖是木糖。

9.权利要求1的方法，其中混合的糖类组合物中的木糖浓度是从约1g/L至约50g/L。

10.制备酶组合物的方法，其包括：

a)将葡萄糖溶液与转糖基化酶混合，产生酶-葡萄糖混合物；

b)在升高的温度下孵育酶-葡萄糖混合物一定时间，所述时间足以产生包含至少一种寡糖的加工的葡萄糖混合物；

c)将加工的葡萄糖混合物与戊糖混合，产生混合的糖类组合物；

d)在有益于蛋白质表达的条件下，将丝状真菌暴露于混合的糖类组合物，产生酶组合物。

11.权利要求10的方法，其中酶组合物包含70％至98％的纤维素酶和2％至30％的木聚糖酶。

12.权利要求10的方法，其中有益于蛋白质表达的条件包括在约25℃和约30℃之间的温度。

13.权利要求10的方法，其中有益于蛋白质表达的条件包括酸性条件。

14.权利要求13的方法，其中酸性条件包括在约4.0和约6.0之间的pH。

15.权利要求10的方法，其中所述酶组合物包括相比没有步骤c)所制备的酶组合物增加至少1.5倍的木聚糖酶。

16.权利要求10的方法，其中所述酶组合物包括相比没有步骤c)所制备的酶组合物增加至少1.5倍的XYN2。

17.权利要求10的方法，其中所述酶组合物包括相比没有步骤c)所制备的酶组合物增加至少1.5倍的XYN3。

18.权利要求10的方法，其中所述酶组合物包括比例为约0.05至约1.5的木聚糖酶比CBH1(w/w)。

19.权利要求10的方法，其中所述酶组合物包括比例为约0.1至约1.0的XYN2比CBH1(w/w)。

20.权利要求10的方法，其中所述酶组合物包括比例为约0.05至约0.5的XYN3比CBH1(w/w)。

21.权利要求10的方法，其中所述酶组合物包括比例为约0.05至约1.5的木聚糖酶比CBH1(w/w)。

22.权利要求10的方法，其中所述酶组合物包括比例为约0.5至约1.0的木聚糖酶比纤维素酶(w/w)。

23.权利要求22的方法，其中所述木聚糖酶包括XYN2和XYN3。

24.权利要求22的方法，其中所述纤维素酶包括CBH1、CBH2和BGL1。

25.根据权利要求1的方法生产的混合的糖类组合物。

26.根据权利要求10的方法生产的酶组合物。

27.降解生物质的方法，其包括将生物质底物与权利要求22的酶组合物接触。