[发明专利]用于从海藻提取物制备琼脂糖聚合物的方法

说明书

发明领域

本发明涉及从江蓠属(Gracilaria)和凝花菜属(Gelidiella)的种的提取物，更具体地从获自古吉拉特(Gujarat)和泰米尔纳德(Tamil Nadu)海岸的印度海域的海藻--Gracilaria dura和凝花菜(Gelidiella acerosa)--的提取物分离琼脂糖的改进方法。

发明背景

可参考Selby & Wynne(R.L.Whistler(ed.)：Polysaccharides and Their Derivatives，第2版，Academic Press，New York 1973，pp.29-48)，其中已阐明大多数商业琼脂通过热水提取产生。其他方法也是可能的，例如利用甘油、无水氨或其他溶剂进行提取，但利用热水的常规方法是最被推荐的(www.marinalg.org)。琼脂提取法可根据处理的海藻种类而变化。它们通常经历三个阶段：(1)提取，(2)纯化，(3)脱水，如下文中描述的：首先，用水仔细地洗涤海藻以除去海盐和杂质例如沙。如果海藻已经历碱处理，那么在压力下或在开放式水箱中利用热水来进行提取。后一种方法主要用于江蓠属海藻以降低所得琼脂的硫酸酯或盐(sulfate)的含量。在热条件下将由99％的水和1％的琼脂组成的提取汁(extraction juice)过滤，然后将其冷却至室温。在机械压力下或通过冷冻-解冻使所得的凝胶脱水。在压力脱水中，施加49-98N/cm²的压力以挤压凝胶通过居间的过滤器。水通过过滤器，而琼脂分子作为滤饼得到保留。在-18℃下进行凝胶冷冻。在该温度下，琼脂分子从冰网络(ice network)中选择性排出并且形成条。解冻步骤使冰解冻并且选择性回收琼脂条。所采取的这两种脱水操作各自除去约70％的初始含水量。然后通过用热空气干燥除去部分残留水分。碾磨干琼脂片以制备具有不同筛目大小的粉末形式的终产物。

可参考Lebbar Thami，Lebbar Rachid和Riad Abdelwahab的专利(美国专利5,496,936)，其中描述了琼脂-琼脂的加工，已在提取步骤中从海藻提取了琼脂-琼脂，随后在脱水步骤中将其脱水以形成琼脂-琼脂凝胶或粉末，其中通过冷冻-解冻或机械挤压或利用单螺杆或双螺杆挤出机来进行脱水。该方法受困于使用冷冻-解冻的耗能操作或需要复杂硬件的机械挤压的繁琐操作的缺点。

可参见D.Du，Z.Zhuang和C.Zhuang的专利(CN1587284-A，2005年3月2日；CNl296390-C，2007年1月24日)，其中按照下述来生产琼脂：“生产方法包括浸渍、中和、漂白和明胶提取。将材料在高温和加压条件下在低浓度碱溶液中浸渍，随后进行过滤，水洗，用酸调整pH，用次氯酸钠漂白，添加助剂(assistant)，煮沸以提取明胶，压滤以脱水和干燥，获得琼脂”。该方法的不利方面在于其使用需要复杂硬件的“压滤来脱水和干燥琼脂”。

可参见Sigma产品目录(2006-2007；第269-270页)，在该目录中其阐明“琼脂糖是从琼脂或具有琼脂的海藻分离的经纯化的直链半乳聚糖水胶体(hydrocolloid)。琼脂形成对于生物聚合物的扩散和电动运动几乎是理想的凝胶基质。因此，其可用于电泳、免疫电泳和免疫扩散”。其中还提及：不同等级的琼脂糖具有在0.10-0.35％范围内的硫酸酯/盐含量，其适合应用于分子生物学、蛋白质电泳和细胞培养。