[发明专利]检测生物学样品中的物质的方法无效
| 申请号: | 201080015608.1 | 申请日: | 2010-03-31 |
| 公开(公告)号: | CN102439446A | 公开(公告)日: | 2012-05-02 |
| 发明(设计)人: | 高仓由光;冈直美;近藤一博 | 申请(专利权)人: | 日本烟草产业株式会社 |
| 主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;C07K17/00 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 沈雪 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 检测 生物学 样品 中的 物质 方法 | ||
1.一种检测生物学样品中的物质的方法,该方法包括下述步骤:
1)准备结合有生物素结合性蛋白质的承载体、以及将生物素结合在特异性结合需检测物质的蛋白质上而成的生物素化蛋白质;
2)藉由生物素-生物素结合性蛋白质间的结合使生物素化蛋白质结合在步骤1)中准备的承载体上,制作结合有生物素化蛋白质的承载体;
3)将(a)生物学样品,以及
(b-i)从与用于表达步骤1)的生物素结合性蛋白质、特异性结合需检测物质的蛋白质、和/或生物素化蛋白质的宿主细胞同种类的细胞制备的细胞破碎提取液,和生物素结合性蛋白质,或者
(b-ii)从通过基因工程技术使与用于表达步骤1)的生物素结合性蛋白质、特异性结合需检测物质的蛋白质、和/或生物素化蛋白质的宿主细胞同种类的细胞表达生物素结合性蛋白质而得到的细胞制备的细胞破碎提取液
混合并添加至步骤2)中制作的结合有生物素化蛋白质的承载体;然后
4)检测特异性结合于生物素化蛋白质的被检物质。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,在步骤3(b-i)中,添加从包含任意载体的细胞提取得到的细胞破碎提取液作为细胞破碎提取液。
3.根据权利要求1或2中任一项所述的方法,其中,所述生物素结合性蛋白质是tamavidin或其突变体。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的方法,其中,所述生物学样品选自血液、血清、脑脊液、唾液、咽拭子、汗、尿、泪液、淋巴液、精液、腹水和母乳。
5.一种用于稀释生物学样品的试剂,该试剂包括:
1)细胞破碎提取液和生物素结合性蛋白质;或
2)从通过基因工程技术表达生物素结合性蛋白质的细胞制备的细胞破碎提取液。
6.一种用于检测生物学样品中的物质的试剂盒,该试剂盒包含:
A)通过生物素-生物素结合性蛋白质间结合而结合有将生物素结合在特异性结合需检测物质的蛋白质上而成的生物素化蛋白质的承载体;以及
用于稀释生物学样品的试剂,所述用于稀释生物学样品的试剂包含:
B-i)从与用于表达A)的生物素结合性蛋白质、特异性结合需检测物质的蛋白质、和/或生物素化蛋白质的宿主细胞同种类的细胞制备的细胞破碎提取液,和生物素结合性蛋白质,或者
B-ii)从通过基因工程技术使与用于表达A)的生物素结合性蛋白质、特异性结合需检测物质的蛋白质、和/或生物素化蛋白质的宿主细胞同种类的细胞表达生物素结合性蛋白质而得到的细胞制备的细胞破碎提取液。
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