[发明专利]用免疫刺激性Hiv Tat衍生物多肽治疗癌症

说明书

与相关申请的交叉引用

本申请基于35USC§119(e)要求2009年3月23日提交的美国临时专利申请号61/162,605，2010年2月19日提交的美国临时专利申请号61/306,278，和2010年3月3日提交的美国临时专利申请号61/310,221的权益。这些申请中每一份的全部内容通过引用被并入本文。 

发明领域

本发明涉及基于免疫的癌症治疗剂领域。 

背景

人免疫缺陷病毒(HIV)转录反式活化因子(Tat)是长度为86到110个氨基酸的可变RNA结合肽，其被编码于HIV基因组的两个分开的外显子上。Tat在所有人慢病毒之间是高度保守的，并且是病毒复制所必需的。慢病毒Tat与TAR(反式活化相应的)RNA区结合时，转录(病毒RNA到DNA随后到信使RNA的转化)水平显著提高。已经证实Tat提高病毒RNA转录，已经提出Tat可在T4细胞和巨噬细胞中引起细胞凋亡(编程性细胞死亡)(针对HIV感染的机体免疫监督系统的关键部分)，并且可能刺激α干扰素的过量生产(α-干扰素是一种公认的免疫抑制性细胞因子)。 

HIV感染过程早期的细胞外Tat存在可降低患者的免疫应答，给予病毒超过宿主的优点。另外，T4细胞的直接破坏和α-干扰素生产的诱导能够帮助解释在获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者中观察到的强烈细胞免疫应答的缺失，以及说明初始时深刻的免疫抑制。 

然而，从HIV-感染的长期无进展者(LTNP)中分离的Tat蛋白质与AIDS患者中存在的C-Tat不同。在LTNP中发现的Tat蛋白质能够反式活 化病毒RNA，然而，LTNP Tat(在下文中称作IS-Tat，表示免疫刺激性Tat)不在T4细胞或巨噬细胞中诱导细胞凋亡，并且不是免疫抑制性的。另外，用分离自LTNP的HIV离体感染的T4细胞(此类细胞系被称作TatTcL)能够导致IS-Tat蛋白质的过表达，通常达到其它病毒蛋白质的虚拟排斥(virtual exclusion)，所述其它病毒蛋白质是强有力地促进生长的，而不是原-细胞凋亡的(pro-apoptotic)。从这些Tat TcL中克隆的Tat基因揭示了位于氨基端和第二外显子第一部分内的两个Tat区中的序列变异。这些令人惊讶的发现能够帮助解释为何被HIV感染的LTNP T4细胞不会以在发展成AIDS的被HIV感染的个体中所观察的惊人速率相继死亡。 

另外，慢病毒中发现了下述Tat变体，所述变体感染猴物种，但是不导致免疫缺陷和流行性感染的发生。这些变体Tat蛋白质指导单核细胞分化成刺激细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答的树状突细胞(DC)。这些猿猴Tat变体和并非免疫抑制性的其它Tat变体已被称作减毒的或免疫刺激性的Tat(IS-Tat)。 

基于使用长期CD4+Tat T细胞系的观察、临床观察和动物实验，减毒的Tat(更特定地IS-Tat，或者已被化学或物理改变的Tat蛋白质)可作为免疫刺激剂作用，激活T4细胞，诱导它们的增殖。该原理可帮助解释在LTNP中观察到的稳定T4水平。另外，与其它活性疫苗(例如但不限于其他病毒、细菌、立克次氏体和癌细胞的疫苗)联合施用时，减毒的Tat可用作佐剂。 

癌症和慢性感染是对基于免疫的治疗应答的常见人疾病的最突出的例子。尽管感染是要通过免疫来控制的首要疾病，但是临床人试验确定免疫应答，尤其是免疫系统的CTL臂的免疫应答，能够使一些人黑色素瘤和肾癌消退。这些观察结果被下述发现扩展：一类特别的抗原呈递细胞(APC)DC尤其有效地引起针对癌症和其它疾病的CTL活性。靶向和活化DC的技术已经导致针对由人乳头状瘤病毒(HPV)感染引起的人脊椎前恶性肿瘤(cervical pre-malignancies)和人肺癌的一些早期成功。与目前针对癌症使用的化学治疗药物相反，激发针对癌症的CTL应答的药剂由于免疫应答的巨大特异性而伴随着极少的副作用。