[发明专利]免疫佐剂组合物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及免疫佐剂组合物、疫苗组合物、对非人类动物的免疫方法、活化免疫细胞制剂以及所述制剂的生产方法。

背景技术

作为与疫苗抗原的混合物来给药的佐剂激活天然免疫，并通过抗原呈递辅助诱导抗原特异性免疫应答。

已知有各种用于动物实验的佐剂。一般的非生物来源的化合物由于其吸附抗原例如病原体的性质被用作佐剂，这类化合物的实例包括氢氧化钠、氢氧化铝、磷酸钙、明矾和羧乙烯聚合物。然而，这些沉淀性佐剂易于引起注射位点硬结。油性物质例如液体石蜡、羊毛脂和弗氏佐剂，由于其囊封水性抗原溶液并形成胶束的能力也被用作佐剂。然而，因为这种油基佐剂与疫苗抗原的混合物形成包含胶束的乳液，因此混合物具有高粘度，其可能引起注射疼痛并易于引起注射位点硬结。

除了上述佐剂之外，几乎不引起内毒素休克等的相对安全的细菌牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)(BCG)，也被用作佐剂。然而，BCG菌体易于在注射位点处引起溃疡。

因为高效佐剂一般具有强毒性，因此一直希望开发安全有效的佐剂。

JP-2008-100919-A描述了作为天然产物来源的佐剂的核酸/多糖复合物，所述复合物由具有天然磷酸二酯骨架和poly(dA)尾的CpG寡核苷酸和分子量为25000以上的β-1，3-葡聚糖构成。该专利文献表明这种核酸/多糖复合物能够促进建立Th1细胞活性优势的细胞因子和抗体的产生，因此该复合物可用作免疫佐剂。

发明概述

技术问题

本发明的主要目的是提供新的免疫佐剂组合物。

问题的解决方案

为了解决上述问题，发明人进行了广泛研究并获得下列发现：

(i)其中Zc3h12a基因已被破坏的同源敲除小鼠(Zc3h12a^-/-小鼠)显示出浆细胞数量的增加和浆细胞向肺的浸润。Zc3h12a^-/-小鼠还显示出血清免疫球蛋白水平升高和自身抗体生产。

(ii)大多数Zc3h12a^-/-脾脏T细胞显示出效应/记忆细胞特征，并对T-细胞受体刺激做出响应产生干扰素-γ。因此，Zc3h12a的破坏激活获得性免疫系统，结果浆细胞和记忆性T细胞数量增加。

(iii)来自Zc3h12a^-/-小鼠的巨噬细胞显示出对TLR(Toll样受体)配体做出响应，IL-6和IL-12p40的生产大量增加。相反，TNF的生产没有对TLE配体作出响应而显著增加。因此，Zc3h12a的破坏增加了特定细胞因子的生产。

(iv)Zc3h12a蛋白具有锌指区并与RNA结合。

(v)Zc3h12a基因含有推定的N-端核酸酶结构域，并且表达的蛋白具有核糖核酸酶活性。鉴于特定mRNA的降解有助于维持其稳态，在Zc3h12a^-/-小鼠中Zc3h12a核糖核酸酶活性的缺失抑制了分子、包括特定细胞因子的mRNA的降解，并增加了分子的生产。

(vi)总之，这些发现表明Zc3h12a基因抑制剂或Zc3h12a蛋白抑制剂可以适合用作免疫佐剂。

根据上述发现完成了本发明，并提供了下述免疫佐剂组合物、疫苗组合物、活化免疫细胞制剂和制剂的生产方法。

(1)免疫佐剂组合物，所述组合物包含选自Zc3h12a基因抑制剂和Zc3h12a蛋白抑制剂的至少一种作为活性成分。

(2)(1)的免疫佐剂组合物，其还包含另一种免疫佐剂。

(3)疫苗组合物，所述组合物包含疫苗抗原以及选自Zc3h12a基因抑制剂和Zc3h12a蛋白抑制剂的至少一种。

(4)(3)的疫苗组合物，其还包含另一种免疫佐剂。

(5)对动物进行免疫的方法，所述方法包含向非人类动物给药(3)或(4)的疫苗组合物。

(6)活化免疫细胞的生产方法，所述方法包含将从对象收获的免疫细胞与选自Zc3h12a基因抑制剂和Zc3h12a蛋白抑制剂的至少一种进行接触、从而活化免疫细胞的步骤。

(7)活化的免疫细胞，所述细胞通过(6)的方法生产。

(8)用于增强疫苗抗原的免疫原性的化合物，所述化合物是选自Zc3h12a基因抑制剂和Zc3h12a蛋白抑制剂的至少一种。