[发明专利]使用酶在DNA中产生随机双链断裂有效

专利信息
申请号: 201080005891.X 申请日: 2010-02-03
公开(公告)号: CN102301009A 公开(公告)日: 2011-12-28
发明(设计)人: 谢沛仲;管楚狄 申请(专利权)人: 新英格兰生物实验室公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 赵蓉民;潘满根
地址: 美国马*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 使用 dna 产生 随机 断裂
【权利要求书】:

1.制剂,其包括:小于1∶200单位比率的非特异性核酸酶和T7 Endo I突变体。

2.根据权利要1所述的制剂,其中非特异性核酸酶是Vvn核酸酶。

3.根据权利要求1或2所述的制剂,其中所述Vvn核酸酶在Q69具有突变。

4.从大的双链DNA产生适合测序的片段的方法,其包括:

(a)将大的DNA与根据权利要求1所述的制剂混合;和

(b)将所述大的DNA切割成大小适合测序的片段。

5.根据权利要求4所述的方法,其中非特异性核酸酶是Vvn核酸酶。

6.根据权利要求4或者5所述的方法,其中所述Vvn核酸酶在Q69具有突变。

7.根据权利要求4-6任一项所述的方法,还包括:在由(b)中切割产生的片段上产生平端。

8.根据权利要求4-7任一项所述的方法,还包括:将具有平端或者单核苷酸突出端的连接物与所述片段的一端或者两端连接。

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