[发明专利]生产L-氨基酸的微生物和使用其生产L-氨基酸的方法

权利要求书

1.一种属于埃希杆菌属的微生物，其具有提高的L-氨基酸生产力和蔗糖同化能力，其通过赋予蔗糖非同化微生物蔗糖通透酶、蔗糖水解酶和蔗糖转录调节子的活性和增强甘露糖激酶活性来制备。

2.根据权利要求1所述的微生物，其中所述增强甘露糖激酶活性通过选自增加甘露糖激酶基因拷贝数量、启动子置换、启动子突变和基因突变的一种或多种方法实现。

3.根据权利要求2所述的微生物，其中所述增加甘露糖激酶基因拷贝数量通过将编码甘露糖激酶的多核苷酸插入染色体中或将所述多核苷酸引入载体系统中实现。

4.根据权利要求3所述的微生物，其中所述载体包含SEQ ID NO.15的碱基序列。

5.根据权利要求1所述的微生物，其中所述蔗糖通透酶、蔗糖水解酶和蔗糖转录调节子的活性是通过用包含编码蔗糖通透酶、蔗糖水解酶和蔗糖转录调节子的碱基序列的载体转化而赋予的。

6.根据权利要求5所述的微生物，其中所述碱基序列是SEQ IDNO.4、6和7的碱基序列。

7.根据权利要求6所述的微生物，其中蔗糖转录调节子的氨基酸序列的130位的氨基酸用酪氨酸取代。

8.根据权利要求7所述的微生物，其中所述蔗糖转录调节子通过SEQ ID NO.17的碱基序列编码。

9.根据权利要求1所述的微生物，其中包含编码蔗糖通透酶、蔗糖水解酶、蔗糖转录调节子和甘露糖激酶的所有碱基序列的载体被用于进行转化。

10.根据权利要求9所述的微生物，其中所述载体由SEQ ID NO.18的碱基序列编码。

11.根据权利要求1所述的微生物，其中属于埃希杆菌属的微生物是大肠杆菌。

12.根据权利要求11所述的微生物，其中所述大肠杆菌是大肠杆菌CA03-0308(保藏号：KCCM 10978P)。

13.根据权利要求1所述的微生物，其中所述L氨基酸选自L-苏氨酸、O-琥珀酰-高丝氨酸、O-乙酰-高丝氨酸、L-甲硫氨酸、L-赖氨酸、L-高丝氨酸、L-异亮氨酸、L-缬氨酸和L-色氨酸。

14.根据权利要求13所述的微生物，其中所述L-氨基酸选自L-苏氨酸、O-琥珀酰-高丝氨酸、O-乙酰-高丝氨酸和L-色氨酸。

15.生产L-氨基酸的方法，其包括以下步骤：

在完全或部分包含蔗糖作为碳源的培养基中接种和培养根据权利要求1至14任一项所述的具有提高的L-氨基酸生产力和蔗糖同化能力的埃希杆菌属微生物；和

从上述步骤得到的培养基中分离所述L-氨基酸。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述L-氨基酸选自L-苏氨酸、O-琥珀酰-高丝氨酸、O-乙酰-高丝氨酸、L-甲硫氨酸、L-赖氨酸、L-高丝氨酸、L-异亮氨酸、L-缬氨酸和L-色氨酸。