[实用新型]一种检测黄热抗体的蛋白悬浮芯片系统

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种检测黄热病毒抗体的蛋白悬浮芯片系统。 

背景技术

黄热病毒属虫媒病毒B组，为RNA病毒、呈球形、约20～60纳米。该病毒在零下70℃下保存10年仍有活力，在室温下容易灭活，0℃下经48小时失去活性。蚊子总是从各种猴子获得病毒，然后通过被感染的雌蚊(已知有20多种)叮咬传播给人，人是病毒的终端宿主，形成猴-蚊-人的链式传播，也可能存在人-蚊-人的循环。黄热病毒引起的急性传染病，病人常出现黄疸伴发热，故名。主要症状有发热、头痛、黄疸和出血等；黄热病的主要病变在肝、肾、心、胃、肠等内脏。由于肝功能受到损害，凝血因子的合成减少，可以导致上消化道出血、渗血以及皮下出血，也可以发生弥漫性血管内凝血，病人经过3～6日潜伏期后出现症状，极轻型病人的症状类似感冒，只有1～2日的发热、头痛；轻型病例呈急性发病，有明显的发热、头痛、恶心、鼻衄、轻度黄疸和蛋白尿，几日后痊愈；重型病例常突然发病，表现寒战高热头痛、背痛、全身痛、恶心、呕吐、面红、眼结合膜充血、末梢血液中白细胞降低，持续数日后，症状减轻，然后再出现发热并开始有黄疸，伴出血倾向，表现为软腭出血点、鼻衄、牙龈出血、呕黑色血水，有时出现蛋白尿甚至无尿，50％病人出现相对缓脉，意识清醒，肝功能受损，血胆红质增高，凝血酶原时间延长，转氨酶升高，肝病重时可出现低血糖，10～60％病人在6～8日后出现休克、昏迷以致死亡。 

免疫学方法酶联免疫实验(ELISA)中利用抗原与抗体特异性反应来检测抗原或抗体主要有由双抗原夹心测抗体、双抗体夹心测抗原、竞争法、间接法等。间接法测抗体的原理是特异性抗原结合到固相载体上，然后和待检血清中的相应抗体结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记二抗与免疫复合物中的抗体结合形成酶标记二抗-抗体-固相抗原复合物，加底物显色，判断抗体含量。 

悬浮芯片(suspension array)也称液相芯片，是20世纪70年代美国Luminex公司研制出的新一代生物芯片技术，利用带编码的微球体作为载体，流式细胞仪作为检测平台，对核酸、蛋白质等生物分子进行大规模测定。目前，该技术已广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、抗体筛选及受体与配体的识别分析等领域。 

目前发展的悬浮芯片主要是基于实验室检测方法的建立和方法评价及优 化，以缩短检测时间，降低方法的检测成本。但是蛋白悬浮芯片方法是否能够检测人血清中的黄热抗体，其定量检测能力如何，尚缺乏模型和评价。 

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种检测黄热抗体的蛋白悬浮芯片系统，该芯片系统包括：芯片基体、加液系统、悬浮芯片检测仪和计算机，其中，芯片基体内装有相关缓冲溶液和待测抗体，相关缓冲液中设置有包被捕获抗原的027号编码微球，加液系统与芯片基体连通，以向芯片基体中加入生物素标记的二抗、荧光信号检测物，悬浮芯片检测仪包括微细管检测通道和检测激光，微细管检测通道与芯片基体连通，该微细管检测通道吸入反应后的溶液、以使得每个编码微球依次通过微细管检测通道，检测激光激发并识别编码微球的颜色及其上待测物的荧光信号，计算机与悬浮芯片检测仪相连，并记录、分析悬浮芯片检测仪的测量结果。 

进一步，所述相关缓冲溶液包括用于所述待测抗体稀释的样品稀释液、稀释所述编码微球所用的微球稀释液、稀释所述生物素标记的二抗所用的抗体稀释液、每个反应之后洗涤编码微球所用的微球清洗液、SA-PE稀释液、检测缓冲液。 

进一步，所述捕获抗原优选为黄热E3蛋白。 

进一步，所述待测抗体为血清样品。 

进一步，所述生物素标记的二抗优选为Biotin-羊抗兔和/或Biotin-羊抗人IgG。 

进一步，所述荧光信号检测物为链亲和素-藻红蛋白。 

进一步，所述芯片基体为96孔滤板或者微量离心管。 

进一步，所述检测激光包括用激发所述编码微球基质中的颜色、识别编码微球分类编码以确定检测项目的红色激光，用于激发并识别待测分子的颜色信号、记录信号强弱以检测所述待测抗体的含量的绿色激光。 

经过大量试验和深入的研究，对黄热抗体的蛋白悬浮芯片制备及其检测条件作了实质性的改进和创新，其具有下列优点： 

1、抗原包被量的改进