[实用新型]磺胺喹噁啉ELISA检测试剂盒无效
申请号: | 201020587037.6 | 申请日: | 2010-10-27 |
公开(公告)号: | CN201852838U | 公开(公告)日: | 2011-06-01 |
发明(设计)人: | 何方洋;余厚美;刘福林;罗贵昆;赵正苗;冯月君;何丽霞 | 申请(专利权)人: | 北京勤邦生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/545 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 102206 北京市昌平区回龙观*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 磺胺 喹噁啉 elisa 检测 试剂盒 | ||
(一)技术领域:本实用新型涉及检测磺胺喹噁啉残留量的试剂盒,特别是检测动物源性食品中磺胺喹噁啉含量的酶联免疫检测(ELISA)试剂盒,ELISA(Enzyme Linked Immunosorbnent Assay)是酶联免疫吸附剂测定的简称,它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种酶免技术。
(二)背景技术:磺胺喹噁啉属磺胺类抗生素兼有抗球虫作用,广泛用于畜禽业,其口服后吸收迅速,但排泄缓慢,残留在组织器官中时间长,存在严重的副作用,人食用后,对人体产生耐药性等副作用,具有潜在的致癌性。世界卫生组织(WHO)规定动物组织、奶的最高残留限量(MRL)值为100μg/kg。日本等国规定肉鸡中不得检出。因此,该药的使用应严格控制用药期及用药量,以保证产品的安全及对外贸易畅通。
目前,常用于磺胺喹噁啉残留检测的方法主要有色谱分析和免疫学方法,仪器分析法主要有高效液相色谱分析法(HPLC)等方法,由于仪器方法操作复杂,前处理过程繁琐、检测费用较高,不适合现场和大量筛查;免疫学检测方法是基于抗原抗体反应,具有样品预处理简单,灵敏度高、特异性好等特点,适宜进行现场大批量筛查,提高检测效率。
(三)实用新型内容:本实用新型所要解决的问题是提供一种小巧轻便的磺胺喹噁啉残留量检测试剂盒,其操作简便,检测快速、准确、灵敏度高,成本低,稳定性好,需要的技术含量不高,可进行一次连续多个样品中磺胺喹噁啉残留量的测定,减少了检测样本所需要的时间。
本实用新型的技术方案是:一种磺胺喹噁啉ELISA检测试剂盒,包括盒体和盒内的一块96孔的酶标板、一张盖板膜、14瓶试剂和放试剂的下凹瓶位、一个自封袋、一份说明书和一份质检报告,其特征在于:酶标板采用96孔试剂板作为固相载体,在试剂盒微孔条上预包被磺胺喹噁啉偶联抗原制成的检测板,14瓶试剂分别为7瓶标准品溶液、酶标二抗、抗体工作液、底物液A液、底物液B液、终止液、浓缩洗涤液、浓缩复溶液,下凹瓶位共15个。
酶标板由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成,每个 可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔,放入真空铝箔袋中,盒体为硬纸盒,下凹瓶位由塑料泡沫制成,以塑料硬膜为盖板膜,盖板膜大小与酶标板横切面大小一致,将14瓶试剂用不同大小、不同颜色的塑料瓶和玻璃瓶盛装并固定在下凹瓶位中与酶标板、盖板膜、自封袋、说明书、质控报告一同封装在硬纸盒内,以便于携带和运输。14瓶试剂分别为7瓶1ml梯度浓度的标准品溶液、7ml酶标二抗、10ml磺胺喹噁啉抗体工作液、7ml底物液A液、7ml底物液B液、7ml终止液、40ml浓缩洗涤液、50ml浓缩复溶液。每一个试剂盒中的试剂足够进行96次测定(包括标准分析孔),既可进行一次连续多个样品的检测,也可以将板孔拆开多次检测。将剩下的放回铝箔袋中用自封袋密封,这样可以保证试剂盒检测结果的准确性。检测时,样本中的磺胺喹噁啉将和酶标板微孔条上预包被的磺胺喹噁啉偶联抗原竞争抗磺胺喹噁啉抗体,加入酶标二抗后,用TMB底物显色,样本吸光度值与样本中所含磺胺喹噁啉的残留量成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中磺胺喹噁啉残留量,其操作简便易行。
经实验表明本试剂盒具有很高的灵敏度:肌肉/肝脏样本的最低检测限为5μg/kg;牛奶样本的最低检测限为20μg/kg;肌肉/肝脏样本的回收率为75%±10%;牛奶样本的回收率为70%±10%;相对于其他磺胺喹噁啉检测方法,本试剂盒所需仪器较少,只需要酶标仪、恒温箱、涡旋仪、离心机、振荡器和微量加样器等,同类实验室一般均有配备,所需成本较低。
本实用新型的有益效果是:能快速、简便、灵敏、准确地用于磺胺喹噁啉残留量的检测。
(四)附图说明:
图1为本实用新型酶联板的侧面纵剖面图(长为8.55cm);
图2为本实用新型酶联板的侧面横剖面图(长为12.8cm);
图3为本实用新型酶联板的俯视图;
图4为本实用新型盖板膜平面图;
图5为本实用新型试剂瓶纵剖面平面图;
图6为本实用新型固定泡沫模具的俯视图;
图7为本实用新型盒体与固定泡沫模具的侧视图。
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