[实用新型]呋喃它酮代谢物ELISA检测试剂盒

说明书

(一)技术领域：本实用新型涉及呋喃它酮代谢物残留量的检测试剂盒，特别是检测水产品中呋喃它酮代谢物残留量的酶联免疫检测(ELISA)试剂盒，ELISA(Enzyme Linked ImmunosorbnentAssay)是酶联免疫吸附剂测定的简称，它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种酶免技术。 

(二)背景技术：硝基呋喃类药物因有非常好的抗菌作用和药动力学的特性，曾经被广泛应用，作为禽类、水产和猪促生长的添加剂。但在长时间的实验研究过程中发现，硝基呋喃类药物和代谢物均可以使实验动物发生癌变和基因突变，正因为如此才导致此类药物禁止在治疗和饲料中使用。 

由于硝基呋喃类药物在体内很快就能被代谢，而在组织中结合的代谢产物则能存留较长的一段时间，所以在分析此类药物的残留时经常要分析其代谢后的产物，管理部门就以检测代谢产物为手段达到检测硝基呋喃类残留的目的。呋喃唑酮代谢产物AOZ；呋喃它酮代谢产物AMOZ；硝基呋喃托英代谢产物AHD；硝基糠腙(呋喃西林)代谢产物SEM。 

用来检测呋喃它酮代谢物的最常用方法是LC-UV，LC-MS和LC-MS/MS，但其检测样本的操作步骤麻烦，检测时间长，一次性检测样本少。 

(三)实用新型内容：本实用新型所要解决的问题是提供一种小巧轻便的呋喃它酮代谢物残留检测试剂盒，其操作简便，检测快速、准确、灵敏度高，成本低，稳定性好，需要的技术含量不高，可进行一次连续多个样品中呋喃它酮代谢物残留量的测定，减少了检验样本所需要的时间。 

本实用新型的技术方案是：一种呋喃它酮代谢物ELISA检测试剂盒，包括盒体和盒内的一块96孔的酶标板、一张盖板膜、15瓶试剂和放试剂的下凹瓶位、一个自封袋、一份说明书和一份质检报告，其特征在于酶标板是采用96孔试剂板作为固相载体，在试剂盒微孔条上预包被呋喃它酮代谢物偶联抗原制成的检测板，15瓶试剂分别为7瓶标准品溶液、酶标二抗、抗体工作液、显色液A液、显色液B液、终止液、浓缩洗涤液、浓缩复溶液、2-硝基苯甲醛，下凹瓶位共15个。 

酶标板由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成，每个 可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔，放入真空铝箔袋中，盒体为硬纸盒，下凹瓶位由塑料泡沫制成，以塑料硬膜为盖板膜，盖板膜大小与酶标板横切面大小一致，将15瓶瓶试剂用不同大小、不同颜色的塑料瓶和玻璃瓶盛装并固定在下凹瓶位中与酶标板、盖板膜、自封袋、说明书、质控报告一同封装在硬纸盒内，以便于携带和运输。15瓶试剂分别为7瓶1ml标准品溶液、12ml酶标二抗、7ml抗体工作液、7ml显色液A液、7ml显色液B液、7ml终止液、40ml浓缩洗涤液、50ml浓缩复溶液，15.1mg 2-硝基苯甲醛。每一个试剂盒中的试剂足够进行96次测定(包括标准分析孔)，既可进行一次连续多个样品的检测，也可以将板孔拆开多次检测。将剩下的放回铝箔袋中用自封袋密封，这样可以保证试剂盒检测结果的准确性。检测时，样本中的残留的呋喃它酮代谢物将和酶标板微孔条上预包被的偶联呋喃它酮代谢物抗原竞争抗呋喃它酮代谢物抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光度值与样本中所含有呋喃它酮代谢物的残留量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中呋喃它酮代谢物的残留量，其操作简便易行。 

经实验表明本试剂盒具有很高的灵敏度：鱼虾样品的最低检测限为0.15μg/kg；鱼虾组织的回收率为75％±15％，同其他呋喃它酮代谢物类似药物的交叉反应率为＜0.1％。相对于其他呋喃它酮代谢物残留检测方法，本试剂盒所需仪器较少，只需要酶标仪、匀质器、振荡机、微量加样器、离心机等，同类实验室一般均有配备，所需成本较低。 

本实用新型的有益效果是：能快速、简便、灵敏、准确地用于水产品中呋喃它酮代谢物残留的检测。 

(四)附图说明：

图1为本实用新型酶联板的侧面纵剖面图(长为8.55cm)； 

图2为本实用新型酶联板的侧面横剖面图(长为12.8cm)； 

图3为本实用新型酶联板的俯视图； 

图4为本实用新型盖板膜平面图； 

图5为本实用新型试剂瓶纵剖面平面图； 

图6为本实用新型固定泡沫模具的俯视图； 

图7为本实用新型盒体与固定泡沫模具的侧视图。